BioTechnicalフォーラム [LONZAから購入した内皮細胞の不死化について]

LONZAから購入した内皮細胞の不死化について

No.8199-TOPIC - 2019/08/28 (水) 07:17:00 - 不死化

いつも勉強させてもらっています。

この度、LONZAからHUVEC（ヒト臍帯静脈内皮細胞）を購入することになりました。
これは初代培養細胞のため、やがて細胞分裂は止まります。
前のラボは病院と近い関係にあったため、その日に出た臍帯をもらい、各自でHUVECを採っていましたが、場所が移り今はそのようなことができなくなったため、LONZAから購入する予定です。

ここで質問させていただきたいのですが、hTERTでのHUVECの不死化は可能でしょうか？
私はヒト線維芽細胞の不死化にhTERTを用い、不死化をさせた経験があります。

SV40LT抗原に比べ、形質をそれほど変えないと予想しています。
ただ、実際のところどうかはわかりませんので、もしみなさまの中でヒト初代血管内皮細胞を不死化された経験のお持ちの方がいらっしゃれば、印象をお聞きしたいです。

どうかよろしくお願いいたします。
　

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No.8199-8 - 2019/08/30 (金) 09:49:41 - asan

可能だそうですが、不死化したことによって性質が変わると考えられるので、
実験によってはそれがそれまでのHUVECと全く同じであるという風には業界では捉えられてないそうです。

だから、はじめにたくさんストックを作って使い捨てで使用した方がベターです。

ま、実験によっては不死化でもいいんではないかと思いますが、それならわざわざHUVC出なくてももともと不死化されたendothelial cellを使ってもいいのでは？
という話にもなってきます。

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No.8199-7 - 2019/08/28 (水) 22:40:03 - 不死化

おおさん、ありがとうございました。

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No.8199-6 - 2019/08/28 (水) 13:16:27 - おお

ある程度Charactorizeした論文は見つかるだろうから調査もしたらどうでしょう。私がしめしたLink先には

Applications Immune response, wound healing, cellular response to viral or bacterial infection, oxidative stress, angiogenesis, arteriolosclerosis, drug screening, tubule formation

Antigen Expression CD31 >75% positive

とかかれてます。

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No.8199-5 - 2019/08/28 (水) 12:43:19 - 不死化

みなさん、大変多くのコメントをいただきまして、ありがとうございました。

まさか売られていたとは思ってもいませんでした。
確認せずトピックを立ててしまい、恐縮しています。

ただ周りを見てもHUVECをLonzaからコンスタントに購入しています。
そのため、やはりhTERTで不死化することで失ってしまう表現型があるのではと勘ぐってしまいますね・・・

一度、hTERTの不死化の方も私の方で行ってみます。
CD31やR2の発現を不死化したものとしていないものとで比較し、tubular formationの能力も比較し、後日アップデートさせていただきます。

ありがとうございました。

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No.8199-4 - 2019/08/28 (水) 11:48:59 - おお

https://www.atcc.org/Products/All/CRL-4053.aspx

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No.8199-3 - 2019/08/28 (水) 09:39:37 - そも

JCRBにもある様です。
https://cellbank.nibiohn.go.jp/~cellbank/cgi-bin/search_res_det.cgi?ID=6720

(無題)

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No.8199-2 - 2019/08/28 (水) 07:57:15 - NS

> hTERTでのHUVECの不死化は可能でしょうか？

売られているので、出来るんでしょう。
https://www.summitpharma.co.jp/japanese/service/s_ATCC_evercyte_htert.html