全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.819-3 - 2012/08/07 (火) 22:03:30 - チンコ 脳のホールサンプルを可溶化剤でいつも通りの方法で処理していませんよね？

Tubulinは？ 削除/引用 No.819-2 - 2012/08/07 (火) 17:11:32 - tkdn 脳というのが具体的にどのようなサンプルを指しているのか分かりませんが、神経系組織では総タンパク量に対してそれほどactinの発現は高くないです。 読む限りですと、タンパク定量やlysis、アプライする量などの問題ではないような気がします。 もう少しexposureを長くするか、Tuj1とかで当ててみては？

脳から抽出したタンパク質のウエスタン 削除/引用 No.819-1 - 2012/08/07 (火) 16:36:11 - WB 目的遺伝子の発現量を培養細胞と脳で比較するためにウエスタンを行っています。 培養細胞と脳から抽出したタンパク質の濃度をBCA法で測定し、全タンパク質量 (20 µg) を合わせてウエスタンを行いました。 ですが、脳のサンプルでは、内在性コントロールであるβ-actinと目的遺伝子のバンドを確認する事ができませんでした。 濃度測定した結果と、実際に泳動したタンパク質の量に大きな差があり、アプライした脳のタンパク量が著しく少ないのではないかと考えています。やはり、BCAでは脳抽出物の濃度測定はできないのでしょうか？ 脳から抽出したタンパク質のウエスタンを行っている方はおられませんでしょうか？ 脳のウエスタンを行う前に、リン脂質の除去をされいる方はおられませんか？ あるいは、脳のウエスタンをどのように行っていますか？ ご教授よろしくお願い致します。

全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---