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細胞播種 単一細胞
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No.8157-TOPIC - 2019/08/13 (火) 10:18:21 - eiehgoh
細胞播種 単一細胞
実験で24ウェルプレートおよび48ウェルプレートに細胞を播種しているのですが,どうも細胞が固まってしまいます.
ウェル上に均一に細胞を分布させたいというのもありますが,何より実験の都合上,あまり細胞同士がくっついてほしくないのです.
大きなディッシュ等であれば,特に問題はないのですがウェルプレートだとどうもうまくいきません.手技の問題だとは思います.
皆さんはウェルプレートに播種する際どのようにして播種していますか.
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No.8157-3 - 2019/08/13 (火) 19:26:51 -
anesthesia
揺する以外についてですと、
培地量を多少少なめにしておくと、細胞をまいて揺すって均一に分布している状態のまま、Dishにくっつきやすいような印象です。(程度問題ですが。)
浮いている間に、真ん中に集まってきてしまうので、
(培養中に死んだ死細胞の残骸は、中心に集まりますよね、それと同じと思っています)
その時間を短くしようという考えです。
(無題)
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No.8157-2 - 2019/08/13 (火) 18:59:52 - ちき
播いた後、円を描くように振盪するな前後左右に振盪しろ、とはよく言われますが、ウェルが小さいとなかなか均一にするのは難しいですよね。
インキュベーターに入れて15分ほどたった後(細胞が沈んだ頃)にもう一度とりだして前後左右に再び振盪すると、少し改善されるような気がしています。
細胞播種 単一細胞
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No.8157-1 - 2019/08/13 (火) 10:18:21 - eiehgoh
細胞播種 単一細胞
実験で24ウェルプレートおよび48ウェルプレートに細胞を播種しているのですが,どうも細胞が固まってしまいます.
ウェル上に均一に細胞を分布させたいというのもありますが,何より実験の都合上,あまり細胞同士がくっついてほしくないのです.
大きなディッシュ等であれば,特に問題はないのですがウェルプレートだとどうもうまくいきません.手技の問題だとは思います.
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