Bio Technical フォーラム

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total RNAを冷蔵庫で数日間安定に保つ方法 トピック削除
No.8155-TOPIC - 2019/08/12 (月) 22:14:51 - きのこ
いつも勉強させていただいております.

微生物から抽出したtotalRNAを用い,RNA-seqを業者に外注しようと考えています,

通常であれば,直ちにドライアイスを詰めクール便で業者に直送すべきところでしょうが,

都合上,業者に送付する前に,totalRNAを4℃の冷蔵庫で2〜3日保管しなければいけません.

この場合,どのような保存方法がもっとも安定にRNAを保てるのでしょうか.

現在考えている方法としては

・エタノール沈殿させ,ペレットの状態で保存
・RNA storage solution(ThermoFisher scientific)等のRNA安定化剤を用いる
・RNAse不活性化剤(和光)を用いる

があります.

似たような経験の有る方,RNA安定化剤など使用経験の有る方ご意見をいただければ幸いです.

生物種:糸状菌
使用キット:RNeasy Plant Mini kit(Qiagen)
 
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(無題) 削除/引用
No.8155-4 - 2019/08/12 (月) 23:57:22 - おお
業者に相談してください。安定化剤をくわえるとそのまま次のステップに入れないだろうと思いますので、エタチンが作業工程としてはやりやすいし、そう問題になる事はないと思いますが、すべて業者の対応次第ではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.8155-3 - 2019/08/12 (月) 22:33:34 - TK-1
いずれにせよ、どうせ再精製しないといけないのなら、ethanol precipitation。

(無題) 削除/引用
No.8155-2 - 2019/08/12 (月) 22:16:49 - きのこ
保存したいのは冷蔵庫で2,3日です.文字化けしてしまい申し訳有りません.

total RNAを冷蔵庫で数日間安定に保つ方法 削除/引用
No.8155-1 - 2019/08/12 (月) 22:14:51 - きのこ
いつも勉強させていただいております.

微生物から抽出したtotalRNAを用い,RNA-seqを業者に外注しようと考えています,

通常であれば,直ちにドライアイスを詰めクール便で業者に直送すべきところでしょうが,

都合上,業者に送付する前に,totalRNAを4℃の冷蔵庫で2〜3日保管しなければいけません.

この場合,どのような保存方法がもっとも安定にRNAを保てるのでしょうか.

現在考えている方法としては

・エタノール沈殿させ,ペレットの状態で保存
・RNA storage solution(ThermoFisher scientific)等のRNA安定化剤を用いる
・RNAse不活性化剤(和光)を用いる

があります.

似たような経験の有る方,RNA安定化剤など使用経験の有る方ご意見をいただければ幸いです.

生物種:糸状菌
使用キット:RNeasy Plant Mini kit(Qiagen)

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