自分で１からクローニングしなくても、かなり特殊な遺伝子や研究者の少ない動物種でなければ遺伝子を扱ってる会社とか公的機関のバンクみたいなところにベクターに組み込まれた状態で大抵はあると思います。検索できると思うので、まず必要な遺伝子があるかどうかそこで確認しましょう。あったら、そこから入手して、大腸菌で入手したプラスミドを増やして、必要に応じて自分の実験目的にマッチした発現ベクター（例えば動物細胞で発現させるならそれ用のベクター）に当該遺伝子をきり貼りで新しいベクターに移して（制限酵素で切断、ライゲーションなど。ここのあたりでうまくいかなくてハマることがしばしばあるので、経験のある人と相談しながら教えてもらいながら実験した方がいいです）、それをまた大腸菌使って適当に増やして、キット使って大腸菌からplasmidを精製して、実験に使います。細胞株ということなので、トランスフェクションしてタンパク質を発現させ地ということでしょうか。発現ベクターもいろいろあるので、その辺は経験のある人にあらかじめ相談されることを勧めます。
時間的な制約や鬱陶しいので楽したいということならば、論文調べて、すでにコンストラクト作って持ってるとこあればそこからもらうのがいちばん早道です。（もらう、大腸菌で増やす、kitで精製 細胞に入れる、みたいな感じ) |
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