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マウスembryoのエタノール置換について トピック削除
No.8113-TOPIC - 2019/07/27 (土) 04:08:46 - Tame
4%PFAで固定済みのマウスwhole embryo を組織学解析のために別のラボへ送ろうと思っています。そこで、最終的に70%エタノールに置換するように指示されているのですが、普通はエタノールを水で薄めるものなのでしょうか?
embryoだからと思いエタノール/PBSにしたところ、何かが析出してきてしまいますが、PBSで割るのはおかしいでしょうか?
 
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No.8113-4 - 2019/07/28 (日) 05:30:57 - Tame
monさん
Mさん

ご回答いただきありがとうございます。

以前いたラボのプロトコルでは脱水をメタノールで行っていました。その際メタノール/PBTと習ったのですが、今回はエタノール置換との指示だったのでエタノール/PBTにしてみたのですが、析出が生じてしまったのでtweenが問題かと思いPBSベースにしたところやはり析出してしまったので、困っていました。

PFA固定後のwashがPBSなのでその後の工程もPBSベースが良いと思った次第ですが、調べてもそのあたりのことが出てこなかったので質問させていただきました。

(無題) 削除/引用
No.8113-3 - 2019/07/28 (日) 03:48:35 - M
普通は水で薄めます。

逆に、PFAで固定済みのembryoで、PBSで割ったエタノールを使おうと思った理由は何でしょう?

(無題) 削除/引用
No.8113-2 - 2019/07/27 (土) 06:39:46 - mon
疑問があるなら相手側に聞いてください。
おそらくパラフィン包埋にするのだと思います。
固定後、水で希釈した70%エタノールを使用します。
ocw.kyoto-u.ac.jp/ja/faculty-of-agriculture-jp/5195000/pdf/01/112.pdf

マウスembryoのエタノール置換について 削除/引用
No.8113-1 - 2019/07/27 (土) 04:08:46 - Tame
4%PFAで固定済みのマウスwhole embryo を組織学解析のために別のラボへ送ろうと思っています。そこで、最終的に70%エタノールに置換するように指示されているのですが、普通はエタノールを水で薄めるものなのでしょうか?
embryoだからと思いエタノール/PBSにしたところ、何かが析出してきてしまいますが、PBSで割るのはおかしいでしょうか?

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