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細胞内リン酸化フローサイトについて トピック削除
No.8092-TOPIC - 2019/07/22 (月) 09:33:27 - 細胞内
いつも勉強させてもらっています。
これから細胞内リン酸化フローサイトメトリーを行うことにしましたが、やはりリン酸化抗体だけでなく、トータルの抗体も合わせて買う必要がありますでしょうか?

たとえばsyk, erk, statの各リン酸化抗体に加え、トータルも合わせると6つ必要になります。これをもしリン酸化抗体だけで済むなら半分で済みますし、コストも半分になります。

もちろんあった方が良いに決まっていますが、実際問題、必ずないと非常識になりますでしょうか?目的は野生型マウスとノックアウトマウスのT細胞におけるシグナルの差異を調べることです。

コメントをお寄せいただけると幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.8092-3 - 2019/07/22 (月) 15:09:19 - おお
リン酸化されたタンパクの機能、活性に注目しているなら、リン酸化されてないタンパク量は二の次。

たんぱく質がリン酸化するというシグナルに着目しないといけないなら両方必要

(無題) 削除/引用
No.8092-2 - 2019/07/22 (月) 10:47:57 - み
あるにこしたことはないだろうけど、
非刺激時と刺激時とかサンプル側でネガティブコントロールが設けられるような実験なら必要性は薄れるでしょう。
またSTATなんかは核移行を免染で併せて示せば特異性は担保しやすいよね。
Westernなど、どれだけ周辺のデータで相補的に現象を論じられるかで必要性は変わってくる。

細胞内リン酸化フローサイトについて 削除/引用
No.8092-1 - 2019/07/22 (月) 09:33:27 - 細胞内
いつも勉強させてもらっています。
これから細胞内リン酸化フローサイトメトリーを行うことにしましたが、やはりリン酸化抗体だけでなく、トータルの抗体も合わせて買う必要がありますでしょうか?

たとえばsyk, erk, statの各リン酸化抗体に加え、トータルも合わせると6つ必要になります。これをもしリン酸化抗体だけで済むなら半分で済みますし、コストも半分になります。

もちろんあった方が良いに決まっていますが、実際問題、必ずないと非常識になりますでしょうか?目的は野生型マウスとノックアウトマウスのT細胞におけるシグナルの差異を調べることです。

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