Bio Technical フォーラム

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遺伝子導入エレクトロポーション法のメーカー トピック削除
No.8084-TOPIC - 2019/07/17 (水) 17:17:32 - さえじまこうさ
お世話になります。
現在研究所にはNeon Transfection System(Thermo Fisher)とAmaxa Nucleofector 2b(ロンザ社)があります。消耗品を購入しどちらかを選択しなければなりません。
miRNAをヒト腫瘍細胞株（接着細胞）に導入予定ですが、どちらか使用された方はいらっしゃいますでしょうか？
コストパフォーマンスや導入効率、使いやすさなどご教示頂ければ幸甚です。
　
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No.8084-9 - 2019/07/22 (月) 11:23:46 - さえじまこうさ
ありがとう　ございます。

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No.8084-8 - 2019/07/19 (金) 11:53:42 - おお
すでに公表されている条件があるということで。
こちらの環境としては機械は利用しようと思えばできるので。AMAXAはパルスの出し方もなんパターンかあるし。Neon のほうは詳しくはわかりませんけど。

(無題) 削除/引用
No.8084-7 - 2019/07/19 (金) 11:12:45 - ***
条件検討するならAMAXAじゃなくてもよさそうですけど。
AMAXAは試薬が高いけど本体は安いんでしたっけ。

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No.8084-6 - 2019/07/19 (金) 05:49:41 - おお
自身のメモにもなるので、Amaxaで自作バッファーを使っている論文を貼っておきます。

ps://reader.elsevier.com/reader/sd/pii/S0006291X1730709X?token=C62E23DB7A949181ECCC794E73CD7C1F64D02F284CB0D0172551070908646BD68147394892F99AA6B0F56767B356CE2E

ps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3238913/

ps://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0003269708008464?via%3Dihub

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No.8084-5 - 2019/07/19 (金) 03:04:20 - さえじまこうさ
ありがとうございます

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No.8084-4 - 2019/07/18 (木) 08:08:57 - おお
>Amaxaは使用したことないけど細胞に応じて違うBuffer買わないといけないんじゃなかったかな？

そんなに難しくない細胞ではDMEMとかで条件を検討したりしてた論文もありました。

(無題) 削除/引用
No.8084-3 - 2019/07/17 (水) 19:26:15 - AA
Thermoのサポートが丁寧なので、初心者はNeonのほうが総じてうまくいく印象があります。
ただ、習熟しかつどっちも使用経験ある人の言によれば、Necleofectorのほうが高効率だそうです。

(無題) 削除/引用
No.8084-2 - 2019/07/17 (水) 17:31:11 - み
Neonは使い捨てチップみたいなものを買うだけで、あとは電圧条件などを変えれば異なる細胞種に使用可能だったと思います。
Bufferは専用のものがなくなればOPTI-MEMで普通に導入できたよ。

Amaxaは使用したことないけど細胞に応じて違うBuffer買わないといけないんじゃなかったかな？ランニングコスト悪そうな印象。最近変わってきているのかな？

遺伝子導入エレクトロポーション法のメーカー 削除/引用
No.8084-1 - 2019/07/17 (水) 17:17:32 - さえじまこうさ
お世話になります。
現在研究所にはNeon Transfection System(Thermo Fisher)とAmaxa Nucleofector 2b(ロンザ社)があります。消耗品を購入しどちらかを選択しなければなりません。
miRNAをヒト腫瘍細胞株（接着細胞）に導入予定ですが、どちらか使用された方はいらっしゃいますでしょうか？
コストパフォーマンスや導入効率、使いやすさなどご教示頂ければ幸甚です。
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