マウス脳の凍結切片スライスについて質問です。
マウスの脳を解剖後4%PFAに漬け、一晩固定し、20%スクロースでスクロース置換を行った後、OCTコンパウンドで包埋しました。
クライオスタットで20μmにスライスし、フリーフロート法を行うためにPBS中に浮かべると、切片がトイレットペーパーのように丸まってしまいます。
アンチロールバーもクライオスタットの温度も使用しているブレードも全て同じ条件でスライスしても、PBS中で丸まってしまうサンプルとそうでないサンプルができてしまい、染色ムラが生じてしまい困っています。
このような状況になってしまう方いますか。
もし丸まってしまう原因を知っていたら教えていただきたいです。 |
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