Bio Technical フォーラム

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「BSAの毎時調整」の頻度 トピック削除
No.8070-TOPIC - 2019/07/10 (水) 12:45:54 - 学部生
初めて質問させていただきます。

1日目にBSA(30mg/ml) 250μl使用して一晩置いたあと、翌日にBSA 2ml使用する予定です。
プロトコルには毎時調整するよう書いてあります。
BSAはオートクレーブにかけないので腐ると聞きますが、実際1日置くと濃度等が変化するのでしょうか。
出来れば2日とも濃度を揃えて実験に臨みたいので、出来れば試薬作りは一回で行いたいと思っています。
 
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(無題) 削除/引用
No.8070-6 - 2019/07/11 (木) 00:10:06 - おお
>滅菌は不要です。

培養に使わない事を願いますが、、、

>吸光度とアルブミンの分子吸光係数からアルブミン液の正確な濃度を算出

ちょっと興味があるんですが、脱脂してないようなアルブミンでもこれで正確に測れるんですかね。

(無題) 削除/引用
No.8070-5 - 2019/07/10 (水) 20:06:58 - @ー@
0.5mlくらいで少量ずつ分注して凍結してます。滅菌は不要です。使用後、溶かして余ったものは捨ててます。アルブミンを適当に1mg/mlくらいで秤量→10-1mg/mlをてきとうに希釈して280んmで吸光度を測る。→吸光度とアルブミンの分子吸光係数からアルブミン液の正確な濃度を算出→小さいチューブに分注して-20 くらいで凍結保存。
1ー2mg/mlのアルブミン標準液も売ってます。

(無題) 削除/引用
No.8070-4 - 2019/07/10 (水) 14:14:05 - qqq
使用量ずつで分注した凍結ストックを作っておいて用時解凍して使えば?
まあ1日の冷蔵保存がアウトというシビアな実験なら1度の凍結融解もアウトかもしれないが…。

(無題) 削除/引用
No.8070-3 - 2019/07/10 (水) 13:15:30 - おお
>プロトコルには毎時調整
そもそもなんの実験かわからない状態で答えるのは無責任になりますのでお答えしかねます。

>BSAはオートクレーブにかけないので腐ると聞きますが、実際1日置くと濃度等が変化するのでしょうか。

濃度が変化するとなぜ思うのか?腐るから?腐ったらそれ以前のもんだいだけど。オートクレーブは無理だけどフィルターはかけれるぞ。
4度なら数にちは大丈夫だと思う。ただしラボの環境、なんに溶けているかなどで変わる可能性があるので、あなたの研究室でそういう実験をしているのなら誰か先輩にでも聞きなさい。

(無題) 削除/引用
No.8070-2 - 2019/07/10 (水) 13:14:27 - 遠さく推し
✖調製

◎調製

「BSAの毎時調整」の頻度 削除/引用
No.8070-1 - 2019/07/10 (水) 12:45:54 - 学部生
初めて質問させていただきます。

1日目にBSA(30mg/ml) 250μl使用して一晩置いたあと、翌日にBSA 2ml使用する予定です。
プロトコルには毎時調整するよう書いてあります。
BSAはオートクレーブにかけないので腐ると聞きますが、実際1日置くと濃度等が変化するのでしょうか。
出来れば2日とも濃度を揃えて実験に臨みたいので、出来れば試薬作りは一回で行いたいと思っています。

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