Bio Technical フォーラム

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顕微鏡写真の重ね方 トピック削除
No.7995-TOPIC - 2019/06/18 (火) 15:14:12 - 初心者
共焦点顕微鏡で蛍光写真を撮りました。バックを低くしようとすると目的タンパク質の蛍光もあまり強くありませんでした。先生からは何枚も重ね撮りをして強度をあげるようにとアドバイスをいただきました。
先生が重ね撮りしていたという顕微鏡は今はなく、私の使っている顕微鏡では重ね撮りモードのようなものはありません。普通の異なる波長のオーバーレイはできます。

ImageJなどフリーソフトで、同じ画像を何枚も重ねる方法を御存知の方いたら教えてください。(ちなみに同じ画像を何枚も重ねて蛍光強度が上がるのかも疑問なのですが、教えてもらえません。)
よろしくお願い致します。
 
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No.7995-7 - 2019/07/03 (水) 15:34:11 - 初心者
TM様、wwm様、あ様、Tracker様、おお様

まだ全ての方法を試せてはいないのですが、
単色を白黒画像にして、重ねた時のみカラーにしました。
明るさを上げつつコントラストを調製した画像を先生に見せた時は、前よりは納得してもらえました。(Scientificに許容できるのかどうかも勉強します。)
御礼が遅くなり失礼致しました。
コメントを下さり有難うございました。

(無題) 削除/引用
No.7995-6 - 2019/06/21 (金) 01:17:01 - おお
かさねるのも、露光時間を伸ばすのも本質的には変わらないですね。蛍光の退色は程度によっては違いがあるかもしれませんけど。

もし色をつけているなら白黒にしてみると見やすくなるかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.7995-5 - 2019/06/21 (金) 01:00:49 - Tracker
重ねて蛍光強度を上げられたとして、バックグラウンドも上がるわけで、なにも解決しないような。。

明るさ上げつつコントラストいじって目的のシグナルを見やすくする、とかの方が単に見やすくするという点ではいいと思いますけど
※その加工の程度がScientificに許容できるのかどうかはしっかりと考えないといけません

(無題) 削除/引用
No.7995-4 - 2019/06/20 (木) 20:50:53 - あ
共焦点の使い方は、本当にマスターしてるのですか?

明るくする方法はたくさんあるから、メーカーに聞くか、
詳しい人に操作方法を聞いた方が良いと思う

(無題) 削除/引用
No.7995-3 - 2019/06/20 (木) 16:20:40 - wwn
カルマン処理の積算でできると思うのですが、いかがでしょう。

(無題) 削除/引用
No.7995-2 - 2019/06/20 (木) 15:37:39 - TM
Image Jのmaximum intensity z-projectionではダメですか? 

顕微鏡写真の重ね方 削除/引用
No.7995-1 - 2019/06/18 (火) 15:14:12 - 初心者
共焦点顕微鏡で蛍光写真を撮りました。バックを低くしようとすると目的タンパク質の蛍光もあまり強くありませんでした。先生からは何枚も重ね撮りをして強度をあげるようにとアドバイスをいただきました。
先生が重ね撮りしていたという顕微鏡は今はなく、私の使っている顕微鏡では重ね撮りモードのようなものはありません。普通の異なる波長のオーバーレイはできます。

ImageJなどフリーソフトで、同じ画像を何枚も重ねる方法を御存知の方いたら教えてください。(ちなみに同じ画像を何枚も重ねて蛍光強度が上がるのかも疑問なのですが、教えてもらえません。)
よろしくお願い致します。

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