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細胞を融解する際のテクニック
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No.794-TOPIC - 2012/07/30 (月) 14:52:57 -
細胞融解に関して
すいません、研究室誰もわからないとのことですので、質問させていただきます
とあるラボマニュアルで細胞を凍結から起こす場合、氷がすべて溶けきらない状態で恒温槽より取り出すことと記載がありました
こうしないと死細胞が多くなるからとのことですが
氷がすべて溶けきると死細胞が多くなる理由は何でしょうか?
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No.794-5 - 2012/07/31 (火) 23:45:24 - 123
完全に溶かして、温めた培地をピペットマンでゆっくり添加していく。
そして温めた培地を入れた15mLチューブに細胞を少しずつ加えていき、急激な環境変化を起こさないようにしないと細胞が死ぬという思想も聞いたことありますよ。
御礼
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No.794-4 - 2012/07/30 (月) 21:12:35 -
細胞融解に関して
皆様
ご返答ありがとうございます。ネットで見つけたラボマニュアルですので
質問しにくくて、こちらで理由を聞かせてもらいました
ありがとうございました
(無題)
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No.794-3 - 2012/07/30 (月) 21:02:01 - Harmonia
「とあるラボマニュアル」を書いた方は、連絡取れないのでしょうか?
(無題)
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No.794-2 - 2012/07/30 (月) 17:49:12 - ~
主に問題になるのは、DMSOの細胞毒性でしょう。
@融解した後に長時間置くと細胞障害が生じる
A氷が少し残っているタイミングというのは誰でもわかりやすい
B氷が多少残っていても、温めた培地ですぐに溶けるため実用上問題は生じない(細胞が1種類以上ある)
等の理由から、そのタイミングでの回収を薦めているのでは。
細胞を融解する際のテクニック
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No.794-1 - 2012/07/30 (月) 14:52:57 -
細胞融解に関して
すいません、研究室誰もわからないとのことですので、質問させていただきます
とあるラボマニュアルで細胞を凍結から起こす場合、氷がすべて溶けきらない状態で恒温槽より取り出すことと記載がありました
こうしないと死細胞が多くなるからとのことですが
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