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(無題) 削除/引用 No.7883-8 - 2019/05/11 (土) 15:09:26 - 初学者 皆様 ご返答頂きましてありがとうございます。 無知のためピントのずれた質問していたようでお恥ずかしいです。 また参考文献もご教授くださいましてありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.7883-7 - 2019/05/11 (土) 12:18:42 - AA 下記の抄録を見ると、HE染色自体に蛍光があるのではと伺えます。（GFPの波長かは不明ですが） ttps://www.jstage.jst.go.jp/article/dermatol/97/13/97_1539/_article/-char/ja/ 標識色素の観察波長に乗ってくるような染色は対比染色として適していないと思いますので HE染色の操作によりGFPが褪色するかどうかを度外視しても、 通常、HE染色を行った切片でGFP蛍光を観察することはないと思います 抗GFP染色を行い、明視野用の染色をする場合は別ですが。 染色の方法論は別として、実験をされるなら正しくコントロールを設定されるべきです。 GFP陽性細胞の移植していないサンプルの切片を作成して、 一緒に染色・観察すれば、HE染色でGFP波長域にバックグラウンドノイズが 生じてしまっているかご自身で判断できるのではないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.7883-6 - 2019/05/11 (土) 09:10:24 - X 同一のセクションで、GFPの蛍光検出（暗視野）とHE染色での形態観察（明視野）を同時に行えるのか、というのが質問の意図ではないかと察します。GFP蛍光とエオジン染色がともに維持される条件で固定封入されている前提で考えると、エオジンの蛍光が問題になる可能性があり、若干強く出ている原因かもしれません。できれば、HE用と未染色GFP検出用に分けて、連続切片で見るほうが良いと思いますが、GFPの蛍光が十分強ければ分けなくても良いかもしれません。 個人的には、パラフィン包埋してセクションを作る場合がほとんどなので、GFPは免疫染色で見てます。ヘマトキシリンのカウンター染色で形態観察もある程度は可能です。

(無題) 削除/引用 No.7883-5 - 2019/05/11 (土) 01:21:51 - *** また質問の意図は全く説明されていません。

(無題) 削除/引用 No.7883-4 - 2019/05/11 (土) 01:09:47 - *** リンク先の答えを要約しますと、明視野染色を蛍光顕観察するのは論外で、免染しろよって言ってるように見えます。

(無題) 削除/引用 No.7883-3 - 2019/05/10 (金) 22:25:41 - 初学者 この質問の意図を要約させて頂きますが、 皆さんは普段GFP蛍光を観察する際は未染色スライドを用いているのでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.7883-2 - 2019/05/10 (金) 17:06:47 - おお http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech3/biotechforum.cgi?mode=view;Code=904

GFP導入癌細胞株由来のXenograft 削除/引用 No.7883-1 - 2019/05/10 (金) 16:36:20 - 初学者 GFP導入癌細胞株由来のXenograftを収穫してスライドを作成しましま。 HE染色したスライドでGFPの評価しても問題ないでしょうか。それとも未染色スライドでないと不適切でしょうか。 若干HE染色したものだとGFPの蛍光が強く出ているような気がしています。

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