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(無題) 削除/引用 No.7865-5 - 2019/05/06 (月) 00:36:11 - X 大腸ではなく小腸ですが、論文が出ているようなので、参考にされると良いと思います。 ttp://jem.rupress.org/content/215/2/441 マクロファージのマーカーは組織によって異なる場合があります。上記論文を見る限り、ヒト小腸のマクロファージではCD11b陰性のポピュレーションがメインのようなので、２色で行くならばHLA-DRとCD14の方が良いかもしれませんね。メインのCD11b陰性マクロファージではCD14の発現が低いですので、ソートの際には気をつけた方が良いですね。FSC/SSCや自家蛍光レベルでダブルチェックできると思います。 ソートで使えるカラーに制限があるようでしたら、ソートに行く前に、CD45、CD11c（HLA-DRを使う場合はDCのコンタミを見るのに必要と思われます）、CD64などを組み合わせたマルチカラーで解析（ソートなし）だけやってみて、これらのマーカーを外しても大丈夫か確認しておくと良いと思います。個人的な印象では、２色ではちょっと厳しい気がしますが、まずは調べて見る事が大切と思います。

P様 有難うございます 削除/引用 No.7865-4 - 2019/05/05 (日) 13:04:32 - Flow 素人 P様 有難うございます。 >マクロファージならF4/80とかよく使われてるよ。CD11bよりはもっとマクロファージ特異的と言える。 人では、F4/80が使用できなくて、何か、良いマーカーがないかなーと思っていたしだいです。CD14だと、MΦに分化すると発現が弱くなってきてしまうので、単利が難しいなーと思っていたしだいです。

(無題) 削除/引用 No.7865-3 - 2019/05/05 (日) 03:09:09 - P マクロファージならF4/80とかよく使われてるよ。CD11bよりはもっとマクロファージ特異的と言える。 マクロファージもM1, M2 中間型とかいろいろあるからね。発現してなかったり発現していても発現レベルもちがうかもしれないものもあると思うのでその辺も注意したほうがいいかも。

追記 削除/引用 No.7865-2 - 2019/05/04 (土) 23:31:09 - Flow+素人 このトピックを書いたものです。 CD68は細胞内染色ですので、マーカーとして使用できません。 マクロファージの単離のために良いマーカーなどがあったら教えてください。

CD11b/CD14 マクロファージ/単球系 削除/引用 No.7865-1 - 2019/05/04 (土) 23:29:17 - Flow 素人 ヒト組織(大腸など)からソーターでマクロファージ/単球系を単離したいと考えています。 ソーターで用いることができる色が少ないため、CD45を用いず、CD11b/CD14のみで単離したいと考えています。 調べている限り、CD11b/CD14は、血球系細胞以外に出ていないようです。 やはり、CD45は必須でしょうか？あるいは、CD11b/CD14 は、炎症部位などが起こっている血球系以外の細胞に出ているでしょうか？ 素人質問で誠にすいません。 よろしくお願い申し上げます。

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