Bio Technical フォーラム

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ピペットで吸えない液体 トピック削除
No.7777-TOPIC - 2019/03/17 (日) 12:45:37 - huran

昨日、QIAGEN製のビーズ精製キットを使って
DNAの電気泳動アガロースゲル精製を行いました。
精製自体はうまくいきました。
ところが、次の日、その精製した溶液から一部をピペットで採取しようとしたところ
チップにほとんど液が吸えないことに気がつきました。
ピペットの故障かと思いましたが、
そういうわけではありません。
チップの先端をハサミで切って入り口を太くしたところ
吸えるようにはなりましたが、
いままでこのような経験をしたことがありません。

この精製キットはこれまで何度も使っていますが
ゲル精製を行うのは今回が初めてです。

洗浄の時に使うエタノールが残留しているのかと思いましたが、
洗浄液自体はピペットで吸うことができるため、
これが原因ではないと思います。

アガロースが残留しているとして、
このようなことがあり得るのでしょうか?

そして、精製した直後は問題なく
1日経ってから溶液の状態が変わるというのは一体どういうことなのでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.7777-3 - 2019/03/19 (火) 00:29:11 - おお
>QIAGEN製のビーズ精製キット
正確な商品名またはカタログ#は何ですか?

抽出しているDNAはプラスミドですかそれともゲノムですか?


ゲノムは一度沈殿すると場合によっては溶けるのに時間がかかり(部分的、局所的にはすぐ溶解する事もある)、溶けると糸を引くようにドロっとしたり、ゲル状になったりします。TEなどを追加してしばらく四、五十度で暖めてやると均一なより扱いやすい溶液になるでしょう。

(無題) 削除/引用
No.7777-2 - 2019/03/18 (月) 02:10:34 - kks
DNAの量が極端に多かったり、長いゲノムDNAだとゲル化してエタ沈を行っても沈殿にならなかったり溶液がなかなか吸えずに弱ったことがあります。
精製後に溶解していても低温で保存したときにゲル化してしまうとかあるかもしれないです。

ピペットで吸えない液体 削除/引用
No.7777-1 - 2019/03/17 (日) 12:45:37 - huran

昨日、QIAGEN製のビーズ精製キットを使って
DNAの電気泳動アガロースゲル精製を行いました。
精製自体はうまくいきました。
ところが、次の日、その精製した溶液から一部をピペットで採取しようとしたところ
チップにほとんど液が吸えないことに気がつきました。
ピペットの故障かと思いましたが、
そういうわけではありません。
チップの先端をハサミで切って入り口を太くしたところ
吸えるようにはなりましたが、
いままでこのような経験をしたことがありません。

この精製キットはこれまで何度も使っていますが
ゲル精製を行うのは今回が初めてです。

洗浄の時に使うエタノールが残留しているのかと思いましたが、
洗浄液自体はピペットで吸うことができるため、
これが原因ではないと思います。

アガロースが残留しているとして、
このようなことがあり得るのでしょうか?

そして、精製した直後は問題なく
1日経ってから溶液の状態が変わるというのは一体どういうことなのでしょうか?

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