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マウス組織中のヒト由来の細胞の検出方法 トピック削除
No.7768-TOPIC - 2019/03/14 (木) 18:17:02 - xenograft
現在、マウスの組織中に局在したヒト由来の細胞の検出したいと思っています。

そこで抗HLA class1抗体とか抗ヒトミトコンドリア抗体などを用いて免疫染色を行っていますが、免疫染色以外でリアルタイムPCRを使って検討できればと考えています。
リアルタイムPCRでどのくらいの細胞数が含まれているかというより、ヒト由来の細胞がマウス組織中に居るか居ないかを知りたいと思っています。


そこで色々と論文を見てみると、組織からゲノムDNAをとってきて、ヒト特異的なプライマー(Alu配列などに対するプライマー)で検出するという方法がよく見受けられます。

しかし、私の場合、組織中に含まれるヒト由来の細胞が極少量であるため、この方法で検出できるか疑問です。

そもそもゲノムDNAではなく、RNAからcDNAを合成して、ヒト特異的なプライマーを用いてリアルタイムPCRをかけるという方法でも良い気がしますが、、、

リアルタイムPCRを用いて、マウス組織中のヒト由来の細胞の有無を検討している方がいましたら、なにかアドバイスをいただけると幸いです。

よろしくお願い致します。
 
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(無題) 削除/引用
No.7768-2 - 2019/03/15 (金) 06:52:10 - おお
http://dev.biologists.org/content/140/14/3062

マウス組織中のヒト由来の細胞の検出方法 削除/引用
No.7768-1 - 2019/03/14 (木) 18:17:02 - xenograft
現在、マウスの組織中に局在したヒト由来の細胞の検出したいと思っています。

そこで抗HLA class1抗体とか抗ヒトミトコンドリア抗体などを用いて免疫染色を行っていますが、免疫染色以外でリアルタイムPCRを使って検討できればと考えています。
リアルタイムPCRでどのくらいの細胞数が含まれているかというより、ヒト由来の細胞がマウス組織中に居るか居ないかを知りたいと思っています。


そこで色々と論文を見てみると、組織からゲノムDNAをとってきて、ヒト特異的なプライマー(Alu配列などに対するプライマー)で検出するという方法がよく見受けられます。

しかし、私の場合、組織中に含まれるヒト由来の細胞が極少量であるため、この方法で検出できるか疑問です。

そもそもゲノムDNAではなく、RNAからcDNAを合成して、ヒト特異的なプライマーを用いてリアルタイムPCRをかけるという方法でも良い気がしますが、、、

リアルタイムPCRを用いて、マウス組織中のヒト由来の細胞の有無を検討している方がいましたら、なにかアドバイスをいただけると幸いです。

よろしくお願い致します。

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