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細胞の適度な量かはどんなに分かりますか? トピック削除
No.7745-TOPIC - 2019/03/08 (金) 18:04:59 - トリス
こんにちは。

二日前か、細胞が不均一に育てると書いたトリスです。
実は、細胞培養について、もうひとつの問題があります。

私の研究所では、細胞懸濁液は使えなくディッシュに培地を10ml入れ、別々のディッシュに細胞を1mlずつ入ります。サブカルチャーするとき、一般的にはディッシュ70個、多いときには120個までもカルチャーしますから。

本気に培養する前、細胞をひとつのディッシュに入って、適度な量かないかを見ますが、そんなにしてもこれが多いのか、少ないのか分かりません。顕微鏡で見ても何の基準もなくて、他人が見てくれなければ分かりません…二日前も、細胞を多く入ってしまいましたから、こいつたち多く増やしすぎでした。TT
大腸菌を触ったので昨日に培養できなく、状態がよくなかった…

細胞の量が適度かどうかを見るためには、カウント以外には答えはありませんか?
 
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(無題) 削除/引用
No.7745-8 - 2019/03/11 (月) 10:49:33 - トリス
うむ。

分かっている経験者に尋ねてみると、自分自身で分かるときまでカウントする、その二つだけですね。

それより英語のお返答、驚きました。

(無題) 削除/引用
No.7745-7 - 2019/03/11 (月) 10:42:32 - トリス
>[Re:6] GGさんは書きました :
> I respect your motivation, but you don't need ask soething in Japanese.
> I'm sorry that your question was slightly dificult for us by erammer issues.
> Why don't you use English? It might be better. Would you mind to write your points again?

I want to ask 'How can I estimate the number of cell that suitable amount'.

(無題) 削除/引用
No.7745-6 - 2019/03/10 (日) 18:13:03 - GG
I respect your motivation, but you don't need ask soething in Japanese.
I'm sorry that your question was slightly dificult for us by erammer issues.
Why don't you use English? It might be better. Would you mind to write your points again?

(無題) 削除/引用
No.7745-5 - 2019/03/09 (土) 06:25:43 - Chinese?
aren't you?

You may need to find person who can teach you!

(無題) 削除/引用
No.7745-4 - 2019/03/09 (土) 00:02:47 - おお
自分で判断できるようになるまではカウントするか、感覚が身についている人に見てもらって判断を仰ぎなさい。

(無題) 削除/引用
No.7745-3 - 2019/03/08 (金) 18:59:34 - mom
qqqさんと同意見ですが、
はじめて扱う細胞は、自分でカウントしながら1回は増殖曲線を記録すべきです。そうすれば、画像(増殖の様子)とコンルエンシーが対応しますので植え継ぎのタイミングや巻き込み数(少なすぎると増えがわるい)がつかめると思います。
培地に濃い細胞懸濁液を垂らして均一にするためには、
プレート(培地)を回さないように、水平に縦に2回揺らす(9cm dishなら2~3cmほど)>波が収まったら横に2回揺らす>>繰り返し3~4回(気分によっては斜めに揺らす)、を行ってみてください。
いろいろな流儀があると思いますので、色々試してください。

(無題) 削除/引用
No.7745-2 - 2019/03/08 (金) 18:43:53 - qqq
慣れれば(均一に撒けて、増殖のペースを把握できれば)鏡検でx%コンフルエントだからy倍希釈で撒き直せばいい、ということも維持培養ではしますが。
前トピを見るに、そう習熟してはいないでしょう。

「他人が見てくれなければ分かりません」というからには分かっている方が近くにいるのだからその人に習って下さい。
手技が不十分な人でもうまく撒く(可能性がある)にはカウントして下さい。

何の用途で何の細胞かも分からないのに、「何倍希釈して撒き直せば大丈夫」とかテキトーなことを言える人はいないですよ。

細胞の適度な量かはどんなに分かりますか? 削除/引用
No.7745-1 - 2019/03/08 (金) 18:04:59 - トリス
こんにちは。

二日前か、細胞が不均一に育てると書いたトリスです。
実は、細胞培養について、もうひとつの問題があります。

私の研究所では、細胞懸濁液は使えなくディッシュに培地を10ml入れ、別々のディッシュに細胞を1mlずつ入ります。サブカルチャーするとき、一般的にはディッシュ70個、多いときには120個までもカルチャーしますから。

本気に培養する前、細胞をひとつのディッシュに入って、適度な量かないかを見ますが、そんなにしてもこれが多いのか、少ないのか分かりません。顕微鏡で見ても何の基準もなくて、他人が見てくれなければ分かりません…二日前も、細胞を多く入ってしまいましたから、こいつたち多く増やしすぎでした。TT
大腸菌を触ったので昨日に培養できなく、状態がよくなかった…

細胞の量が適度かどうかを見るためには、カウント以外には答えはありませんか?

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