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免疫染色 蛍光 がん トピック削除
No.7728-TOPIC - 2019/03/02 (土) 15:07:22 - ピクサー
現在、マウスを発がんさせて、腫瘍が大きくなったら脳を摘出し、蛍光免疫染色で血管を見ています。顕微鏡で見るとき、血管以外に血の塊のように染色される部分がいくつくかあり(腫瘍部分のみ)血管量の比較ができません。
理由として考えたのは、腫瘍血管は透過性が上がっているので出血していた。
また、がんがあることで灌流が完全ではなく、血球が反応してしまっている。
など考えました。
何でもよいので理由として考えられることを教えていただきたいです。
 
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No.7728-8 - 2019/03/05 (火) 05:09:27 - ぺんぺん
Macさん、フォローをありがとうございます。

私はマウスで、ですが胎児期とアダルトの組織染色をよく行なっています。
特にPLT、MKを長く研究していますが、CD31はマウスではPLT、MKいずれもアダルトでは組織レベルでは発現していないように見えます。

(無題) 削除/引用
No.7728-7 - 2019/03/05 (火) 03:30:08 - Mac
少なくともアダルトのヒト血小板はCD31陽性でfunctionalみたいです。PECAM1のPはplateletですしね。(と言いつつ、私もCD31がplateletで発現している事を、今回初めて認識しました。)

ttp://www.bloodjournal.org/content/bloodjournal/99/1/137.full.pdf?sso-checked=true

(無題) 削除/引用
No.7728-6 - 2019/03/05 (火) 02:02:08 - ぺんぺん
確かに胎児期の血小板、MKはCD31陽性ですが、アダルトで循環PLTやMKはCD31陰性だと思いますが、いかがでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.7728-5 - 2019/03/04 (月) 13:01:40 - そも
血の塊といえば、血小板のCD31が染まっている可能性もありますね。

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No.7728-4 - 2019/03/03 (日) 18:39:31 - Mac
出血とすれば、赤血球の自家蛍光を見ている可能性を考えます。二次抗体抜きのコントロールを見れば分かりますね。

CD31陽性の単球、マクロファージ系の細胞が腫瘍に浸潤している可能性もあると思います。一部の腫瘍細胞がCD31を発現する可能性も、完全には否定できないでしょう。血管内皮マーカーをもう一種類加えて二重染色にすれば、より正確に血管内皮の局在を確認できると思いますよ。

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No.7728-3 - 2019/03/02 (土) 18:51:38 - ピクサー
発がんさせたマウスの凍結切片に、抗CD31抗体を用い、血管を染めています。
脳全体にあるわけではなくがんのある部位だけあるので、非特異的反応や自家蛍光ではないと思います。

(無題) 削除/引用
No.7728-2 - 2019/03/02 (土) 18:41:59 - AP
蛍光免疫染色? 標的、抗体、標識は何?

その血の塊みたいなものは非特異的反応や自家蛍光の可能性はないの?

免疫染色 蛍光 がん 削除/引用
No.7728-1 - 2019/03/02 (土) 15:07:22 - ピクサー
現在、マウスを発がんさせて、腫瘍が大きくなったら脳を摘出し、蛍光免疫染色で血管を見ています。顕微鏡で見るとき、血管以外に血の塊のように染色される部分がいくつくかあり(腫瘍部分のみ)血管量の比較ができません。
理由として考えたのは、腫瘍血管は透過性が上がっているので出血していた。
また、がんがあることで灌流が完全ではなく、血球が反応してしまっている。
など考えました。
何でもよいので理由として考えられることを教えていただきたいです。

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