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マルチウェルプレートでのコンタミ対応 トピック削除
No.7727-TOPIC - 2019/03/02 (土) 00:23:00 - 培養細胞A
いつもお世話になっております。
最近、ノックアウト細胞のクローニングを多々行っている際にマルチウェルプレートの1ウェルだけコンタミするような状況に出くわします。
自分は飛散しないよう恐る恐るwashして抗生物質を濃度マシマシで入れて大体事なきを得ているのですが、皆さんはマルチウェルプレートでのコンタミはどう対応されているのかなと気になりました。
以前他の研究室との会話では置いておかずに捨てるという意見もあったのでマイノリティなのかなと思った次第です。
 
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No.7727-5 - 2019/03/02 (土) 20:44:50 - 培養細胞A
おお様
回答ありがとうございます。やはり原則プレートごと廃棄するようですね。
他人へのコンタミ拡散に関しては胸に刺さる部分がありました。
手技等のアップデートはともかく、対応に関しては少し考えようと思います。

moz様
回答ありがとうございます。
以前はしばしば抗生物質を入れて培養していたのですが、無くても通常の作業には支障なかったので長い間ご無沙汰でした。
長期間かかる実験では一時的に導入したほうが良いかもしれませんね。

(無題) 削除/引用
No.7727-4 - 2019/03/02 (土) 07:04:34 - moz
基本的にはプレートごと捨てます。酵母・カビのときは絶対捨てます。
長期の培養などコンタミのリスクが大きいときには抗生剤(ゲンタシンが多いかな)をあらかじめ加えています。
どうしても残したい場合は、コンタミしたウェルをEtOHで2回ほど洗浄・滅菌・乾燥します。ウェルの壁面上部リング・蓋内側全面もEtOHで2回拭き取り清浄化します。
もちろん記録もします。

(無題) 削除/引用
No.7727-3 - 2019/03/02 (土) 04:25:34 - おお
マルチウェルプレートは大変コンタミしにくいのでそういう経験はありませんが、コンタミした場合はプレートごと捨てるでしょう。

コンタミは手技の問題なのか、環境の問題なのか、それともある程度はおこる可能性があるほどの操作が必要になっているのかわかりませんけど、それぞれ見直してください。また、周囲の人の細胞へのコンタミ拡散も配慮しないといけないかと。

ただ捨てると書きましたが、非常に貴重な細胞、労力、期間がかかった実験だったりするときは、なんとかしようとするかもしれません。どうかな、もしコンタミしてない細胞だけ他のプレートに移せるならそのプレートは捨てれるわけだし。

(無題) 削除/引用
No.7727-2 - 2019/03/02 (土) 00:31:16 - 培養細胞A
あ、言葉足らずで申し訳ありません。
コンタミしたウェル、細胞は当然ながら継続して培養・継代は行いません。
細菌の拡散防止を期待してコンタミしたウェルに抗生物質を入れ、マルチウェルプレートでの培養を継続しているという意味です。
他の研究室の方の意見は1ウェルでもコンタミが見られたならマルチウェルプレートを丸々手放すという意味です。

マルチウェルプレートでのコンタミ対応 削除/引用
No.7727-1 - 2019/03/02 (土) 00:23:00 - 培養細胞A
いつもお世話になっております。
最近、ノックアウト細胞のクローニングを多々行っている際にマルチウェルプレートの1ウェルだけコンタミするような状況に出くわします。
自分は飛散しないよう恐る恐るwashして抗生物質を濃度マシマシで入れて大体事なきを得ているのですが、皆さんはマルチウェルプレートでのコンタミはどう対応されているのかなと気になりました。
以前他の研究室との会話では置いておかずに捨てるという意見もあったのでマイノリティなのかなと思った次第です。

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