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(無題) 削除/引用 No.7681-2 - 2019/02/13 (水) 15:16:29 - おお https://www.future-science.com/doi/pdf/10.2144/96215st06 Protein A は使ってないけど、過剰発現させてプラスミドが入った細胞を回収する系で(50 beads per potential target cells）と書いている。この論文の系はガンガン発現しそうな細胞だから大体上限と見てもいいかもしれない。

＃細胞分取＃磁気ビーズの必要量と分離の方法について 削除/引用 No.7681-1 - 2019/02/13 (水) 09:18:40 - ぽんきち お世話になります。 この度、磁気ビーズを用いて細胞を濃縮することとなりました。 磁気ビーズはプロテインAの付いた磁気ビーズで、細胞はセルラインです。 まず細胞を染めたのち、抗体で染め、その後に磁気ビーズでトラップしたいです。 細胞の元手は100mmディッシュ1枚分で、ビーズの使用量を決めかねています。 インビトロジェンから購入したビーズは1ml入っています。 Dynabeads™ Protein A for Immunoprecipitation (Catalog number #10001D) 具体的にどれくらい使えばいいのでしょうか？ また、磁気フィールドにサンプルを静置後、エンリッチした細胞から磁気ビーズを除去するバッファーというものがあるのですが、それはみなさん使われていますか？ 今回私が行ったプレ実験では、60マイクロリットルのビーズを使い、磁気フィールドでエンリッチ後、ビーズから剥がさずそのまま6ウェルディッシュに移動させました。翌日、細胞は元気に接着していました。 みなさんはどのようにされていますか？ 教えてください。宜しくお願いいたします。

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