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バッファーのpHについて… トピック削除
No.7628-TOPIC - 2019/01/30 (水) 17:26:41 - レベル29のライチュウ
こんにちは。

今売っているバッファーや作って使うバッファーの中には、10Xとか5Xとかに濃縮して使うものがあります。たとえばPBSやTBS、TBE、TAEのようなものです。

このバッファーのpHって、濃縮溶液のpHですか、それとも希釈したときのpHですか?たとえばPBSのpHが7.4のとき、これは10XのpHですか、1XのpHですか?
 
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No.7628-8 - 2019/01/31 (木) 10:35:05 - おお
http://cshprotocols.cshlp.org/content/2009/3/pdb.rec11725.full
こちらにはMg,Caフリーのレシピがかかれています。

(無題) 削除/引用
No.7628-7 - 2019/01/31 (木) 10:21:18 - レベル29のライチュウ

> すみません、意味が分かりません。どちらのレシピも最終的に燐酸イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩素イオンからなる溶液になると思います。2価陽イオンって具体的になんですか?マグネシウムとかカルシウムですか?マグネシウムやカルシウムが入ってないダルベッコのレシピが実際にありますよ。
>

マグネシウムとカルシウムです。

http://cshprotocols.cshlp.org/content/2006/1/pdb.rec8247 <<ここを参考しました。

(無題) 削除/引用
No.7628-6 - 2019/01/31 (木) 10:17:17 - おお
>陽イオンは入りません。ダルベッコのレシピでは2価陽イオンが入ると聞きましたが、私が作るのは塩化ナトリウム、塩化カリウム、燐酸二水素ナトリウムと燐酸水素カリウムだけを使うのです。

すみません、意味が分かりません。どちらのレシピも最終的に燐酸イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩素イオンからなる溶液になると思います。2価陽イオンって具体的になんですか?マグネシウムとかカルシウムですか?マグネシウムやカルシウムが入ってないダルベッコのレシピが実際にありますよ。

(無題) 削除/引用
No.7628-5 - 2019/01/31 (木) 09:24:53 - レベル29のライチュウ
>[Re:4] おおさんは書きました :
> PBSバッファーの場合ダルベッコのレシピではpHを合わせずに理論的第一第二燐酸塩の比でpHが合うようになっています。これは1xの時のレシピで、10xをそのレシピで作ると経験的には7より少し低いpH(古いpH試験紙での確認なのでどの程度正確は分かりません)になっています。1xにすると少しpHがあがります。しかしを塩酸などであわす10xPBSのレシピも存在します。

陽イオンは入りません。ダルベッコのレシピでは2価陽イオンが入ると聞きましたが、私が作るのは塩化ナトリウム、塩化カリウム、燐酸二水素ナトリウムと燐酸水素カリウムだけを使うのです。

(無題) 削除/引用
No.7628-4 - 2019/01/30 (水) 23:56:03 - おお
PBSバッファーの場合ダルベッコのレシピではpHを合わせずに理論的第一第二燐酸塩の比でpHが合うようになっています。これは1xの時のレシピで、10xをそのレシピで作ると経験的には7より少し低いpH(古いpH試験紙での確認なのでどの程度正確は分かりません)になっています。1xにすると少しpHがあがります。しかしを塩酸などであわす10xPBSのレシピも存在します。

TBE、TAEはおそらく1xのレシピを10倍にしてpHをあわせないパターンと思われますので10xでのpHはドンピシャじゃないかと。

TBSは10xでpHをあわすなら1xでは微妙にずれているでしょう。ただ、1M Tris (pH 調製済み)でいろいろなバッファーを作ることも多いでしょうからそういう意味ではすべてにおいてどれほど正確性を求めているかということになるでしょう。

(無題) 削除/引用
No.7628-3 - 2019/01/30 (水) 17:55:49 - レベル29のライチュウ
そうですね。

それでは、PBSバッファーは10Xのときも、1XのときもpHが7.4であるのですね。

(無題) 削除/引用
No.7628-2 - 2019/01/30 (水) 17:52:29 - おお
どっちの場合もあります。

バッファーのpHについて… 削除/引用
No.7628-1 - 2019/01/30 (水) 17:26:41 - レベル29のライチュウ
こんにちは。

今売っているバッファーや作って使うバッファーの中には、10Xとか5Xとかに濃縮して使うものがあります。たとえばPBSやTBS、TBE、TAEのようなものです。

このバッファーのpHって、濃縮溶液のpHですか、それとも希釈したときのpHですか?たとえばPBSのpHが7.4のとき、これは10XのpHですか、1XのpHですか?

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