BioTechnicalフォーラム [寒天培地に発生したゴミ]

寒天培地に発生したゴミ

No.7609-TOPIC - 2019/01/25 (金) 16:58:17 - mai

フラスコで寒天培地を作りシャーレに流したところ、固まってすぐに白く小さなゴミの混入に気づきました。
培地を処分して作り直したところ、再度同じようなゴミが混入していました。
白いゴミが混入しそうな工程があまり思いつかず、原因が特定できません。

自分が思いついた理由が、以下の3点です。
●フラスコの目盛が、オートクレーブの熱などで剥がれて混入した
●シリコン栓の洗浄が不十分
●クリーンベンチのHEPAフィルターを交換すべき

他にごみが入りそうな原因をご存知の方がいらっしゃれば、教えていただけると幸いです。
よろしくお願いします。
　

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No.7609-8 - 2019/01/25 (金) 23:33:01 - mai

ありがとうございます。
組成確認してみます。

前任者が温度が高いまま培地を注いでいるのが気になり、保温の際の設定温度を下げてみて綺麗に固まるようになり順調に培養ができていました。
しかし、最近になって白いゴミという新たな問題がでてきた、という状況です。

(無題)

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No.7609-7 - 2019/01/25 (金) 20:18:56 - AP

業者から買っているという製品の組成は一応確認したほうがいいと思う。

あとはポリソルベートがあやしいかな。
あんまり温度が高いうちに注ぐと、ゲル内で相分離が起こっているかもしれない。
あるいは撹拌してすぐに注いだため、気泡が入ってそれが白く見えているのかもしれない（作製直後は目立たない小さな気泡でもあとで膨張して目立つようになることもある）。

(無題)

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No.7609-6 - 2019/01/25 (金) 18:28:20 - mai

寒天培地用のものを業者から購入して使用しています。
検体を加えるときはリン酸緩衝液を使用しているので、その影響も少しはあるかもしれませんが、希釈していない検体でも白いゴミのようなものが出てきます。

(無題)

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No.7609-5 - 2019/01/25 (金) 18:24:45 - AP

液体培養を用途とするリン酸塩が入ったバージョンで寒天培地を作ろうとしていない？
寒天培地用のはリン酸塩を抜くようだけど。
リン酸がカルシウムイオンなどと難溶性の塩を形成して析出してんでしょう。

(無題)

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No.7609-4 - 2019/01/25 (金) 17:55:55 - mai

返信ありがとうございます。
使用している培地はSCDLPで、石けんの試験をしています。