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大腸菌コンピテントセルDH5αの転換効率について
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No.7600-TOPIC - 2019/01/23 (水) 10:20:41 -
AT
通常−80℃で保存しているDH5αをこちらの初歩的なミスで常温で3時間ほど放置してしまったのですが、形質転換効率はかなり下がりますでしょうか...
後ほどポジコンでトランスフォーメーションを行おうと思っております。
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No.7600-3 - 2019/01/23 (水) 13:26:16 - ぺんぺん
ぺんぺんです。
ぺんぺんなら、気持ちが悪いので、その一部から井上法で新しいバッチのものをさくっと作ってしまいますね...
おおさんのアイデアには同意です。もう一度凍結させてすでに出来上がったものをトラフォメするだけの目的で使用したらいいと思います。
(無題)
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No.7600-2 - 2019/01/23 (水) 10:34:00 - おお
>−80℃で保存しているDH5αをこちらの初歩的なミスで常温で3時間ほど放置してしまったのですが、
そういう悪くなってしまったかもしれないものは、IntactのプラスミドをTFして精製して増やすとき専用にして、Ligationなど高い形質転換効率のものが好ましい場合には使わないようにしたらどうですか?
大腸菌コンピテントセルDH5αの転換効率について
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No.7600-1 - 2019/01/23 (水) 10:20:41 -
AT
通常−80℃で保存しているDH5αをこちらの初歩的なミスで常温で3時間ほど放置してしまったのですが、形質転換効率はかなり下がりますでしょうか...
後ほどポジコンでトランスフォーメーションを行おうと思っております。
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