Bio Technical フォーラム

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トランスフェクションの効率に関して トピック削除
No.7543-TOPIC - 2019/01/08 (火) 17:58:05 - Tori
お世話になっております。最近遺伝子操作実験はじめた初心者です。

研究室の先輩が浮遊細胞で強制発現株を作るのを見て、なぜ293使わないですかと聞いたところ、ものによってはよく使う293とかにトランスフェクションしても発現しなくて、浮遊細胞にすると発現するものもある、とういうことでした。

いつも293かCHO使っているので、とても遺伝子入りやすい印象ですが、皆様はこのような経験ありますでしょうか。

どのようなものは293などになかなか入れなくて、浮遊系の細胞にほうでよく発現するのでしょうか。例を挙げていただけると幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.7543-4 - 2019/01/14 (月) 17:26:58 - いけ
細胞株によって発現量のよいpromoterと悪いpromoterがあります。
http://www.lonzabio.jp/tech/pdf/tech_10.pdf

(無題) 削除/引用
No.7543-3 - 2019/01/09 (水) 09:44:42 - み
発現プロモーターの相性が関係することもあるかも。
あとは蛋白が293では分解されやすくて検出しにくいだけとか。

(無題) 削除/引用
No.7543-2 - 2019/01/09 (水) 04:51:40 - おお
浮遊細胞ということは血液系の細胞でしょうか?それなら293とは細胞のタイプが違いますし、前者で発現しやすい蛋白があっても不思議ではないと思えますが。

293でもアダプテーションをすれば浮遊細胞として使えると思いますし、、、

トランスフェクションの効率に関して 削除/引用
No.7543-1 - 2019/01/08 (火) 17:58:05 - Tori
お世話になっております。最近遺伝子操作実験はじめた初心者です。

研究室の先輩が浮遊細胞で強制発現株を作るのを見て、なぜ293使わないですかと聞いたところ、ものによってはよく使う293とかにトランスフェクションしても発現しなくて、浮遊細胞にすると発現するものもある、とういうことでした。

いつも293かCHO使っているので、とても遺伝子入りやすい印象ですが、皆様はこのような経験ありますでしょうか。

どのようなものは293などになかなか入れなくて、浮遊系の細胞にほうでよく発現するのでしょうか。例を挙げていただけると幸いです。

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