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(無題) 削除/引用 No.7536-4 - 2019/01/09 (水) 10:43:54 - 中年 長く置くと可溶化できなくなるとの指摘もありますね。私の見ていたタンパク質の場合は、一晩の放置で目立った差はありませんでした。 http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/ohmiken/Lab%E3%83%A1%E3%83%A2/memo%208.html

(無題) 削除/引用 No.7536-3 - 2019/01/08 (火) 23:02:42 - 1 TCA入れた時点で、ほぼ全ての蛋白質は変性して生物活性を失うとおもうのでプロテア＾ゼとかが働く心配はほぼない。NaOHとか強アルカリだとペプチド切れることあるけど、酸は長時間煮沸でもしない限りはそういうこともおきない。 なので、問題ないとおもう。

(無題) 削除/引用 No.7536-2 - 2019/01/05 (土) 12:08:39 - おお わたしはたまにー８０度に入れて保存したりしますが、、、 そんなルーティーンにやっているわけではないので微妙な違いとかはいえませんが、大抵はそれで何とかなってます。 あなたの実験であなたが見るタンパクがどうなるかという点では大丈夫ですと言い切れませんけどね。

TCA沈殿を4度一晩でもいいでしょうか？ 削除/引用 No.7536-1 - 2019/01/05 (土) 11:42:43 - のり 明けましておめでとうございます。 現在無血清培地に含まれるタンパク質の解析目的で、細胞の培養培地に1/10量の100% TCAを加え、氷上1時間後にマックス遠心、冷アセトンで洗浄という操作で濃縮しています。 この度、急遽の都合でTCAを加えたのち、一晩ステップを進められそうにありません。 質問は、TCAを加えて、タンパク質を変性させますが、これを一晩4度で放置してもその後のタンパク質解析(western blotting)に支障ありませんでしょうか？ すみませんがご教示いただけますと幸いです。

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