Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

LPSのIPでマクロファージ取れますか? トピック削除
No.7531-TOPIC - 2019/01/03 (木) 09:49:01 - Crazy DC
とあるタンパクのKOマウスよりPeritoneal macrophage を回収してきて、LPS刺激でTNF-a産生を測るという、至ってありふれた系を与えられましたが、個人的にちょっと気になっている点があります。

よくあることですが、このvitroの系の結果と、vivoの結果がどうも一致しない気がしています。

そこで、vivoでLPS刺激かけてからmacrophageを取ってきて、intraでTNF-a産生を検出してみようかなと思ってます。Sepsis-likeのモデルのようなものです。
とは言っても、完全にコントロールが取れた整合性を見れる系ではないと思っています。ひとまず、確認のためにやるvivoの実験というところです。

通常、LPSをIVするのですが、peri-macを取りたいということから、LPSはIPでもいけますでしょうか?

LPSのIPでmacrophageを取った経験がある方がいたらご教授お願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.7531-6 - 2019/01/04 (金) 04:31:31 - ペンペン
ペンペンです。

LPSにはrough LPSとsmooth LPSとがあり、分子量が大きく違うので質量を言われてもこちらとしては返答しかねます。

モル数でいくらくらいですか?

LPS O114という分子種をマウスの25mg/kgで打っていました。

論文をまずは調べて見てください。

(無題) 削除/引用
No.7531-5 - 2019/01/04 (金) 04:02:21 - Crazy DC
ペンペンさん、


すみません、再度お聞きします。

500ug/mLのIPで24h→Peri-MAcを回収してTNF-a intraを考えていますが、LPS量はこのくらいでいけますか?多すぎますか?

(無題) 削除/引用
No.7531-4 - 2019/01/03 (木) 11:46:29 - Crazy DC
皆様ありがとうございます。

使ったことが無い系でしたし、論文ではPP打ってから最後にLPSとかだったのでちょっとどうなのかと思っていましたが、LPS単独でいけると分かって安心しました。

まずはLPS打って回収して、intraでサイトカインを見てみようと思います。

(無題) 削除/引用
No.7531-3 - 2019/01/03 (木) 11:01:35 - おお
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2751568/
こんなんありました。

(無題) 削除/引用
No.7531-2 - 2019/01/03 (木) 09:56:31 - ペンペン
LPSをIP投与して腹腔マクロファージは取れますよ。大部分がそうだと思います。
18-24時間後に回収していましたが、48時間だと死んでる細胞が多いかもですね。
また、回収した細胞をビトロでカルチャーはできませんでした。すぐに死滅しました。

LPSのIPでマクロファージ取れますか? 削除/引用
No.7531-1 - 2019/01/03 (木) 09:49:01 - Crazy DC
とあるタンパクのKOマウスよりPeritoneal macrophage を回収してきて、LPS刺激でTNF-a産生を測るという、至ってありふれた系を与えられましたが、個人的にちょっと気になっている点があります。

よくあることですが、このvitroの系の結果と、vivoの結果がどうも一致しない気がしています。

そこで、vivoでLPS刺激かけてからmacrophageを取ってきて、intraでTNF-a産生を検出してみようかなと思ってます。Sepsis-likeのモデルのようなものです。
とは言っても、完全にコントロールが取れた整合性を見れる系ではないと思っています。ひとまず、確認のためにやるvivoの実験というところです。

通常、LPSをIVするのですが、peri-macを取りたいということから、LPSはIPでもいけますでしょうか?

LPSのIPでmacrophageを取った経験がある方がいたらご教授お願いいたします。

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。