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2型膜貫通タンパク質のC末タグ抗体でフロー検出可能でしょうか トピック削除
No.7508-TOPIC - 2018/12/23 (日) 05:03:44 - tomo
2型膜貫通タンパク質のウエスタンに対する抗体はあるんですが、フローで使える抗体はないです。
ある薬剤のそのタンパク質の膜発現への影響を調べる目的でフローをしたいのですが、最悪、強制発現の系で評価したいです。

そこでC末にmycタグを付け、強制発現後、9E10モノクロでフローサイト解析したいのですが、これは原理上可能でしょうか?9E10がフローに使えるのかは分かりません。が、免疫沈降には使えるはずなので問題かなと考えています...

C末がプロセシングを受ける可能性やら色々考えることはありますが、原理的なことでお聞きしたいです。
C末タグが膜局在に影響するかもわかりませんが、2型膜貫通タンパク質なら大丈夫かなと考えています。(根拠はないですが...)
 
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(無題) 削除/引用
No.7508-5 - 2018/12/25 (火) 06:48:10 - tomo
おおさん、ありがとうございます!

(無題) 削除/引用
No.7508-4 - 2018/12/25 (火) 05:54:47 - おお
各社販売している9E10はFlow cyto可能となっているのが多いようですね。

(無題) 削除/引用
No.7508-3 - 2018/12/24 (月) 11:21:53 - tomo
みさん

ありがとうございます!
プラスミドはもう出来上がったので明日トラフェして、明後日ファックスしてみます!

(無題) 削除/引用
No.7508-2 - 2018/12/24 (月) 09:52:50 - み
>[Re:1] tomoさんは書きました :
>
> そこでC末にmycタグを付け、強制発現後、9E10モノクロでフローサイト解析したいのですが、これは原理上可能でしょうか?9E10がフローに使えるのかは分かりません。が、免疫沈降には使えるはずなので問題かなと考えています...

可能と考えます。やってみないと分りません。


>
> C末がプロセシングを受ける可能性やら色々考えることはありますが、原理的なことでお聞きしたいです。
> C末タグが膜局在に影響するかもわかりませんが、2型膜貫通タンパク質なら大丈夫かなと考えています。(根拠はないですが...)
>

その通り根拠はないですが、大丈夫かなと思います。
1週間でできる仕事でしょうからトライしたら良いと思います。

2型膜貫通タンパク質のC末タグ抗体でフロー検出可能でしょうか 削除/引用
No.7508-1 - 2018/12/23 (日) 05:03:44 - tomo
2型膜貫通タンパク質のウエスタンに対する抗体はあるんですが、フローで使える抗体はないです。
ある薬剤のそのタンパク質の膜発現への影響を調べる目的でフローをしたいのですが、最悪、強制発現の系で評価したいです。

そこでC末にmycタグを付け、強制発現後、9E10モノクロでフローサイト解析したいのですが、これは原理上可能でしょうか?9E10がフローに使えるのかは分かりません。が、免疫沈降には使えるはずなので問題かなと考えています...

C末がプロセシングを受ける可能性やら色々考えることはありますが、原理的なことでお聞きしたいです。
C末タグが膜局在に影響するかもわかりませんが、2型膜貫通タンパク質なら大丈夫かなと考えています。(根拠はないですが...)

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