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(無題) 削除/引用 No.750-4 - 2012/07/12 (木) 23:59:16 - sedou 塩化シアヌルなんて初めて聞いたので、興味本位で調べてみました。塩化シアヌルというのは活性塩素（こういう言葉も初めて聞きました）を持つ、かなり反応性の高い薬品のようですね。ホルマリンと似て、アミノ基（2級に結合するというのは確認しましたが、それ以外は見つからず）や糖鎖の水酸基などに結合するようです。固定はこのあたりの反応性の高さを利用した訳でしょう。とすると、普通に考えるとDNAはかなりダメージを受けると考えた方が自然なような気はします。 骨肉腫だからと言ってこんなに強く固定する理由はなんでしょう？単純に強く固定したいだけならPFA中に長くつけば良いだけのように、素人には思えるのですが。

(無題) 削除/引用 No.750-3 - 2012/07/12 (木) 23:31:24 - Harmonia ＞この再固定が後のDNA解析に影響することはないでしょうか。 DNA解析手法のどれかには、影響するでしょうね。 というぐらいしか、答えにくい。 具体的に、どういう解析を予定しているか、列挙して。 そしたら、それをやったことある人は、大丈夫だったとかダメだったとか言いやすいから。

(無題) 削除/引用 No.750-2 - 2012/07/12 (木) 21:41:21 - ami http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2012/biotechforum.cgi?mode=view;Code=748

Goland-吉木法について 削除/引用 No.750-1 - 2012/07/12 (木) 15:00:57 - 染色マシン 類骨染色のGoland-吉木法について質問です。 （周りに精通していらっしゃる方がいませんので、広く ご意見を伺いたく、投稿させていただきます） 骨肉腫検体で、パラフィン切片を作る予定です。 まずはGoland-吉木法でオステオイドを確認し、そのパラフィン 切片からDNAを抽出して、遺伝子解析をする予定です。 そこで質問ですが、組織を10％中性緩衝ホルマリンで固定後、 塩化シアヌル液（組成：塩化シアヌル、メタノール、4-メチル モルホリン）で再固定してしまいますが、組織内のDNAに対し、 この再固定が後のDNA解析に影響することはないでしょうか。 これまで、パラフィン切片を用いたPCR法、in situは経験あり ますが、塩化シアヌル液を使った方法は初めてですので、 どんな影響があるのか･･･検体が少ないので、予備検討もまま ならず、どなたかご経験があれば教えてくださいますでしょうか。

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