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初代培養細胞の培地の件 トピック削除
No.7495-TOPIC - 2018/12/18 (火) 19:30:15 - 1
ある組織から得た初代培養幹細胞を購入して使用するよていです。数社から販売されていますが、同じ細胞にもかかわらずメーカーによって指定の培地がことなり、その価格が倍以上違います。論文等では、一般的な数千円の培地で培養していたりもします。メーカー推奨培地を使用しないといけないということはあるのでしょうか。お金がないので、安くてすむならそのほうがいいとおもっているので。
 
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No.7495-5 - 2018/12/22 (土) 21:22:24 - 1
みなさまありがとうございます。
メーカー等にも聞いてみましたところ、いきなり変更すると細胞の具合がわるくなることが多いので、別の培地にする必要があるときは段階的にあたらしい培地の比率を増やして馴化させるようにとのアドバイスをいただきました。

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No.7495-4 - 2018/12/20 (木) 13:07:10 - BB
歯髄だと間葉系幹細胞がメインですかね?一般的に10%FBSを加えて培養することが多いように思いますがいかがでしょう?
さらにFGF2を加えて増殖促進したり、defined mediumのために無血清にしているものもあると思います。そういったものは付加価値的に価格が上乗せされますし、後者については組成も開示してくれないでしょう。やはりおおさんの言う通り、いくつか文献を当たってみて、基本的な培養スタイルを調べた方がいいと思います。
そのうえでこの因子を培地に添加する必要があるのか、等について議論を進めることが現実的と思います。

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No.7495-3 - 2018/12/19 (水) 12:49:01 - 1
細胞は歯髄幹細胞(DPSC)です。いろんな論文をみると、自分で分離、樹立された人達はαMEMをベースにFBSと抗生剤と2~3のありふれた物質を加えたシンプルなものを使用しているものが多く、これがスタンダードのようなのですが、市販品だと,ベースの培地名も不明で、いろんなサプリメントを入れていて、その濃度や成分が明らかにされていないので、今後いろいろな実験をする上で困るので、できるならば、何がはいっているか全て分かっているなるべくシンプルな培地でできれば、とおもい聞きました。あと年度末でお金が少なくなってきたというのも理由の1/3くらいあります。よろしくおねがいします。

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No.7495-2 - 2018/12/19 (水) 03:32:34 - おお
>メーカー推奨培地を使用しないといけないということはあるのでしょうか。

いけないということはないと思いますが、、、

キット化やライセンス化で付加価値を売っているだけで中身は一緒だったりもしますから、まずは組成を調べてみること。直接的な記述がなければ(引用していたら)リファレンスをあたってみること。

おそらく文献等で樹立されている方法で培養できるでしょうから、あなたのみたい現象を扱っている文献と同様の方法でいいと思いますけどそれは推測でしかありません。何代か継代できるなら指定の培地で増やしておいてストックをつくってから、安い培地にシフトして様子を見るのも手です。

具体的にどの細胞なのか明示していいなら同様の細胞を使っている人が見れば書き込んでくれるかもしれません。

初代培養細胞の培地の件 削除/引用
No.7495-1 - 2018/12/18 (火) 19:30:15 - 1
ある組織から得た初代培養幹細胞を購入して使用するよていです。数社から販売されていますが、同じ細胞にもかかわらずメーカーによって指定の培地がことなり、その価格が倍以上違います。論文等では、一般的な数千円の培地で培養していたりもします。メーカー推奨培地を使用しないといけないということはあるのでしょうか。お金がないので、安くてすむならそのほうがいいとおもっているので。

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