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(無題) 削除/引用 No.7474-6 - 2018/12/12 (水) 12:20:11 - おお Colloidal CBBでそめてみたら？ 銀染色は温度で速さが変わってくるみたいだから、温度を下げた状態でDevelopしてみたら？

(無題) 削除/引用 No.7474-5 - 2018/12/12 (水) 10:33:14 - み >[Re:3] 銀線さんは書きました : > そうですよね。ただ総タンパク質量に占める目的のタンパク質が非常に少ないので、すくなるする勇気がありません。。といいつつ今1/5量をロードしているところですが。 サンプル量を減らすまたは発色速度を遅くしても、総蛋白に対する目的蛋白の比率は変わらないでしょう。真っ黒にならなければ目的蛋白が認識できるバンドのパターンが期待できるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.7474-4 - 2018/12/12 (水) 09:20:37 - 1 銀染色は、過去にさまざまな人達が工夫や改良を重ねた結果いろんな処方のものがあります。市販のキットを使用されているならば、別のものに変えてみるとかしてみたらどうでしょうか。これまでいくつかのメーカーのものを使ったことがありますが、高感度だけどバック高いもの〜感度いまいちだけどバックがあがりにくいもの〜発色がすごくゆっくりのもの〜はやいものまでいろいろで、発色もバンドの色がどれも同じような感じから、バンドによって色調が微妙にことなるもの（たぶん糖鎖の関係とおもう）までいろいろでした。 あと銀染色は脱色することもできますので、ためしてみたらどうでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.7474-3 - 2018/12/12 (水) 08:40:00 - 銀線 みさん、早速ありがとうございます。 そうですよね。ただ総タンパク質量に占める目的のタンパク質が非常に少ないので、すくなるする勇気がありません。。といいつつ今1/5量をロードしているところですが。 例えば反応液を2倍や4倍に希釈して、ゆっくり反応を進めるとかそういったアイデアがあるのかなと期待してトピックを立てたのですが、そんな方法はないでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.7474-2 - 2018/12/12 (水) 08:35:34 - み 泳動するサンプル量を減らせば良いだけのような気がします

銀染色の反応が早すぎる 削除/引用 No.7474-1 - 2018/12/12 (水) 08:05:52 - 銀線 お世話になります。 めんちんサンプルの銀染色の最後のステップですが、バンドが上がって来そうだなー、もう数秒待ってみようかなー、おっ染まり出して来たー。 そこからすぐに反応液を捨て、酢酸を加えて停止させるのですが、もうレーン全部が真っ黒です...。 いいタイミングで反応を停止させたいのですが、いい方法はありませんか？ 大変初歩的な質問で恐縮ですが、宜しくお願いします。

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