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(無題) 削除/引用 No.7324-5 - 2018/10/19 (金) 10:16:49 - k.+komiyakawa+ >[Re:4] monさんは書きました : > グラディエントは、A液 Buffer, B液 NaClの混合ですか？ > それとも、A液 Buffer, B液 Buffer+1M NaClの混合ですか？ > 前者だとBufferが薄まりますのでBuffer由来の吸光度が下がると思います。 > 後者でも、A液とB液の吸光度が異なれば（理由は不明）変化すると思います。 > A液 Buffer： リン酸緩衝液 B液 Buffer： A液 + 1M NaCl です。 他のバッファーでも同じ様にB液様に 1M NaClを混ぜても同じ様になります。 個別に吸光度はチェックしてみます。

(無題) 削除/引用 No.7324-4 - 2018/10/17 (水) 19:19:33 - mon グラディエントは、A液 Buffer, B液 NaClの混合ですか？ それとも、A液 Buffer, B液 Buffer+1M NaClの混合ですか？ 前者だとBufferが薄まりますのでBuffer由来の吸光度が下がると思います。 後者でも、A液とB液の吸光度が異なれば（理由は不明）変化すると思います。

(無題) 削除/引用 No.7324-3 - 2018/10/17 (水) 15:06:16 - k.+komiyakawa+ おお様 レスありがとうございます。 ＞単なる水に一滴１M　NaClを落としたら、何かもやっとしたものが あのもやったしたもの、UV検出器に引っかかるのですね。 ミキサーがあっても急激なNaCl濃度の変化の影響を受けてしまうのですね。。。 ＞サンプルをのせてない状態ですか？ サンプルが乗っていてもじわじわベースが下がっているがわかります。 サンプルを乗せないとベースラインのドリフトははっきりわかります。

(無題) 削除/引用 No.7324-2 - 2018/10/17 (水) 15:00:04 - おお >NaClグラジェントをかけていると >UV280のベースラインがだんだん下がってしまいます。 サンプルをのせてない状態ですか？ ＞後1M NaClで満たされた流路を低塩濃度の平衡化バッファーで たとえば単なる水に一滴１M　NaClを落としたら、何かもやっとしたものが見えることがありますよね。それと同じようなことが起こっているといえるでしょう。

イオン交換クロマトのUV280について 削除/引用 No.7324-1 - 2018/10/17 (水) 14:14:04 - k. komiyakawa 疑問が2点あります。 イオン交換クロマトで溶出の際、NaClグラジェントをかけていると UV280のベースラインがだんだん下がってしまいます。 NaClのグラジェントの際はいつもこのようなことが起こるのですが、 なぜこのようなことが起こるのかご存知のかたいらっしゃったら 教えていただきたいです。 また、溶出が終わった後1M NaClで満たされた流路を低塩濃度の平衡化バッファーで置換すると、UV280のピークが現れるのですが、 これもなぜでしょうか。 ご存知の方、いらっしゃったらぜひ教えていただきたいです。 どうぞよろしくお願いいたします。

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