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(無題) 削除/引用 No.7306-7 - 2018/10/12 (金) 00:22:29 - PD みなさん、ありがとうございました。 納得です。 若干インキュベート時間は長くなりますが、まあコス7細胞ですし、問題が起きそうでしたらやめておきます。 in-houseはホームメイド、自家調製したものみたいです。自作かな。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.7306-6 - 2018/10/12 (金) 00:18:26 - ＠ 未修飾のそのままのトリプシンは自己消化するので、そんなことしたらだんだんこわれていくとおもう。実際、TOF-MASSでPMFとかやってた時代はトリプシン分解物はよく検出されたので、自分でこわれていくんだなと思った。市販の細胞培養用トリプシンは純度がそんなに高くなくて他のプロテアーゼもそれなりに夾雑してて、それがかえっていい感じで相加的にはたらいて、細胞の剥離を助けてるって聞いた事がある。 ていうかインハウスってどういう意味ですか？

(無題) 削除/引用 No.7306-5 - 2018/10/11 (木) 06:13:56 - おお >てっきりサイトミューテーションで切られにくくされているもの それはそういう商品なのかどうか答えてる人はわからんとおもうけど

(無題) 削除/引用 No.7306-4 - 2018/10/11 (木) 05:26:34 - PD 37Cさん、おおさん、ありがとうございます。 やはりそうなんですねー。ありがとうございます。 てっきりサイトミューテーションで切られにくくされているものとばかり思っていました。 前のラボでは思いっきり37度で温めていましたね。 今のラボでは4度で取り出したらさっそく使っています。

(無題) 削除/引用 No.7306-3 - 2018/10/11 (木) 05:24:40 - おお https://pdfs.semanticscholar.org/dd95/97b519d4ab8470d4acb1e524f6233c0ecd96.pdf?_ga=2.121214088.1411997159.1539201982-1209796760.1530209123 これだと１時間で半分ぐらいは切れてしっかつしてるようだ。

(無題) 削除/引用 No.7306-2 - 2018/10/11 (木) 04:44:08 - 37C 剥がれが悪いのが事実であれば失活したということでしょう。 細胞外マトリックスを専門に研究しているラボと細胞培養室を共有していたことがあります。そのラボではトリプシンを37Cにするのは厳禁で、恒温槽にボスの顔写真付きで「トリプシンは絶対ここに入れるな！」という張り紙がされていました。なにか拘りがあったんでしょうね。

培養細胞用のトリプシン 削除/引用 No.7306-1 - 2018/10/11 (木) 04:27:44 - PD 瑣末な質問ですが、みなさん、トリプシンEDTAはインハウスだったり、コマーシャルなものだったりを使っておられると思いますが、やはりセルフクリベイジされ、活性がへたることってありますか？ コマーシャルなものを解凍してたのですが、オーバーナイトで37度放置していたためなのか、なんか剥がれが悪い気がします。 やはり失活してしまったのでしょうか。。

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