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御礼 削除/引用 No.7271-6 - 2018/09/28 (金) 22:47:56 - sk 皆さま 貴重なご意見ありがとうございました。 必ずしも翌日コロニーが生えてこない可能性があるということが分かってよかったです。 ちなみに私が現在使用している抗生剤もカナマイシンです。 今回のケースはコンタミしたイーストの可能性もありますが、 このコロニーをシーケンスして確かめてみたいと思います。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.7271-5 - 2018/09/28 (金) 14:04:30 - PLAS 購入品でも、自分で作成したプラスミドでもそういった経験があります。 私もカナマイシンで起こったなあと思いました（本当にカナマイシンが原因であるかはわかりません）。 もちろんのこと、そのコロニーから望むプラスミドが採れるかはご確認ください。

(無題) 削除/引用 No.7271-4 - 2018/09/28 (金) 12:36:12 - AP 抗生物質の種類によるところもある。 high copyとlow copyで適したdoseが違うところ、low copyにhigh copy向けの濃度を適用した。 プラスミドにクローニングされている遺伝子にもよる。leaky expressionが大腸菌に毒性を持つような場合。 ２日後に生えてきたコロニーは本物だったですか？ コンタミだとか、抗生物質がへたったところに非形質転換体が生えてきたとか？

(無題) 削除/引用 No.7271-3 - 2018/09/28 (金) 11:41:18 - おお ないことはないですが、コンタミしたイーストの可能性はあります。大腸菌によっては増殖がおそくO/Nではコロニーが見にくいことはあります・

(無題) 削除/引用 No.7271-2 - 2018/09/28 (金) 11:20:29 - チャコ 最近まさにそれですね...一晩では非常に小さく、諦めて放置して翌日見たら生えていた、というのがありました。それを100mlカルチャーしましたら増えがよく、きちんとモノはとれました。カナマイシンのものだけが特にこうなりました。

プラスミドによる大腸菌の形質転換 削除/引用 No.7271-1 - 2018/09/28 (金) 10:18:16 - sk 質問失礼します。 大腸菌へ抗生物質耐性遺伝子をもつプラスミドを導入し、 その抗生剤を含む培地でincubateしたところ、 2日後にコロニーが生えてきました。 通常では、翌日にはコロニーが生えてくると思いますが 上記のような経験はございますか？ ぜひご意見いただければと思います。 よろしくお願いいたします。

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