Bio Technical フォーラム

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固相化した蛍光標識抗体の定量 トピック削除
No.7252-TOPIC - 2018/09/21 (金) 20:12:30 - Mahiro
いつもお世話になります。

研究で、糸くず状の繊維表面に蛍光標識抗体を固定したのですが、
その繊維一本の表面にどれだけその抗体が固定されているかを算出したいと考えています。

現在は蛍光顕微鏡でその繊維一本一本を見ることができており、また抗体一つにどれだけ蛍光物質(FITC)が標識されているかもわかっています。また繊維全体にわてったのの蛍光強度の総量も見られています。

ただ、顕微鏡で得られた蛍光強度が相対蛍光強度のようで、強度の値からどのように抗体量に変えればいいか思案しております。

一度濃度の分かっている蛍光標識抗体の溶液などを用いて、蛍光強度と抗体量の相関を見るべきでしょうか?

ご指摘いただけますと幸いです。よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.7252-2 - 2018/09/22 (土) 03:09:24 - おお
そのラベルした繊維を伸ばしていくとどれくらいの長さになるかとか分からないの? 重量とか太さとかいろいろなパラメーターから計算できないの?

固相化した蛍光標識抗体の定量 削除/引用
No.7252-1 - 2018/09/21 (金) 20:12:30 - Mahiro
いつもお世話になります。

研究で、糸くず状の繊維表面に蛍光標識抗体を固定したのですが、
その繊維一本の表面にどれだけその抗体が固定されているかを算出したいと考えています。

現在は蛍光顕微鏡でその繊維一本一本を見ることができており、また抗体一つにどれだけ蛍光物質(FITC)が標識されているかもわかっています。また繊維全体にわてったのの蛍光強度の総量も見られています。

ただ、顕微鏡で得られた蛍光強度が相対蛍光強度のようで、強度の値からどのように抗体量に変えればいいか思案しております。

一度濃度の分かっている蛍光標識抗体の溶液などを用いて、蛍光強度と抗体量の相関を見るべきでしょうか?

ご指摘いただけますと幸いです。よろしくお願いいたします。

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