Bio Technical フォーラム

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cDNA合成酵素 トピック削除
No.7251-TOPIC - 2018/09/21 (金) 20:09:28 - Q
新しく定量的PCRの実験系を立ち上げようと考えています。
cDNAの合成酵素(2 step型)についてなにを使うか検討しています。
どこのメーカーのどの酵素が良いか、おすすめがあれば教えてもらえないでしょうか?
用途は一般的なqPCRで、GCリッチや長鎖のものは解析予定にはありません。
判断基準は価格と逆転写効率(Oligo dTで)のコスパです。
よろしくお願いします。
 
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No.7251-6 - 2018/09/22 (土) 11:53:39 - ぬぬ
うちはタカラのリアルタイムPCR装置を導入した流れから、PrimeScript RT Master Mixです。

遺伝子クローニングを行うときはSuperScript IV(oligo dT)を使うようにしています


お値段を気にするのであれば、お安い逆転写酵素は各社出しています。

SuperScript IIの特許が切れた関係から、完コピ品が出回るようになりました。
(メーカーから直接聞いて知っていますが、秘密かもしれないのでここに商品名を記載することは避けます)

(無題) 削除/引用
No.7251-5 - 2018/09/22 (土) 00:04:35 - 太郎
SuperScript IV > RevaTraAce, PrimeScrip I, SuperScript III >= PrimeScript II, Transcriptor

プライマーはqPCRならrandomとOligo-dTの混合で。
PrimeScript IIは私の実験系では安定した結果が出ませんでした。

(無題) 削除/引用
No.7251-4 - 2018/09/21 (金) 23:27:32 - AP
qRT-PCRならoligo-dTよりrandomの方が合理的。
oligo-dTとrandomでプライミングする一液型のRevaTra AceはqRT-PCRをルーティンにやるには便利だし安定している。

(無題) 削除/引用
No.7251-2 - 2018/09/21 (金) 21:17:06 - あかね
以前、各社のRT酵素の比較をしたことがります、
SuperScriptIV, III, PrimeScript II > PrimeScript I, RevaTraAce > Transcriptor,

SuperScriptは高いだけあってパフォーマンスは良かったです。
比較的低価格と同等のパフォーマンスを有するPrimeScriptIIを気に入って使っています。

cDNA合成酵素 削除/引用
No.7251-1 - 2018/09/21 (金) 20:09:28 - Q
新しく定量的PCRの実験系を立ち上げようと考えています。
cDNAの合成酵素(2 step型)についてなにを使うか検討しています。
どこのメーカーのどの酵素が良いか、おすすめがあれば教えてもらえないでしょうか?
用途は一般的なqPCRで、GCリッチや長鎖のものは解析予定にはありません。
判断基準は価格と逆転写効率(Oligo dTで)のコスパです。
よろしくお願いします。

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