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(無題) 削除/引用 No.7228-4 - 2018/09/13 (木) 11:36:12 - mon 死細胞由来のDNAが混入しているのかな？ DNase処理等でサラサラになりませんか？

(無題) 削除/引用 No.7228-3 - 2018/09/13 (木) 09:23:04 - ういうい おお様 回答頂きありがとうございます 後からで申し訳ないのですが、PEG溶液を加える前には 0.45μmのフィルターでの濾過を行なっています。 それでもそのあとPEG溶液を加え、一晩4℃で放置し 遠心すると白い沈殿ができてしまいます。

(無題) 削除/引用 No.7228-2 - 2018/09/13 (木) 02:22:18 - おお 0.45umのフィルターならいいと書いてあるプロトコールはあります。 PEGで沈殿する前に0.4５um のフィルターでデブリなど除いてから沈殿などして回収するというプロトコールが出回ってます。 どろどろしているのは死んだ細胞の細かなデブリから来ているんじゃないかなと思うので沈殿などする前になるべく除いた方がよさそうですがどうでしょう。

レンチウイルスのPEG沈殿 削除/引用 No.7228-1 - 2018/09/12 (水) 23:46:18 - ういうい お世話になります レンチウイルスを濃縮液を使って濃縮すると 白い沈殿ができ、これを培地に懸濁するとドロドロになり コンタミと紛らわしいです。複数個の遺伝子分を同時に導入しようとすると かなりドロドロになると思うので、ちゃんと感染するのか心配でもあります。 フィルトレーションするとウイルスの塊がフィルターを通らないので ダメという話をどこかで見かけたのですが、軽く遠心して除くのは 問題ないでしょうか？

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