Bio Technical フォーラム

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go taq master mix の融解・凍結の回数について トピック削除
No.7213-TOPIC - 2018/09/08 (土) 11:23:27 - 狼女
初心者です。宜しくお願いします。

コムギのPCRにプロメガのGoTaq® Green Master Mixを使っています。

北海道地震による停電で25ml・4本が24時間常温になってしまいました。
その後、電力が戻り今は凍結状態に戻っています。

【質問は、これを解凍して分注→さらに冷凍して保存してもPCRには問題なく使えるでしょうか?】
gotaqの状態は、
25mlボトルで凍結状態→24時間常温状態→再び凍結・・・(今後の予定)→ボトル25mlを再び解凍→チューブに分注→再び−20度で凍結して保存→その都度使う

先輩たちからは解凍は1〜2回までと教えられてきました。サイトでは4度で2週間、融解解凍は厳禁、との情報もありました。今回は12時間常温保存だった上にさらに冷凍にしてしまいました。

宜しくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.7213-3 - 2018/09/08 (土) 19:05:09 - 狼女
moz様

返答ありがとうございました。
安心しました。
予算が少なくて今年度の新規購入は難しいと言われており、
不安な気持ちでいました。
お忙しい中ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.7213-2 - 2018/09/08 (土) 15:12:11 - moz
最近のPCR酵素は精製度が高くプロテアーゼ等の混入はないので、おそらく安定だと思います。
他社製Taqを使った2xMasterMix製品を使っていますが、20回ほどの凍結融解で何ら問題ないです。TaqなんてPCRサイクルの変成温度で、それこそタンパクの高次構造は乱れていますので。

go taq master mix の融解・凍結の回数について 削除/引用
No.7213-1 - 2018/09/08 (土) 11:23:27 - 狼女
初心者です。宜しくお願いします。

コムギのPCRにプロメガのGoTaq® Green Master Mixを使っています。

北海道地震による停電で25ml・4本が24時間常温になってしまいました。
その後、電力が戻り今は凍結状態に戻っています。

【質問は、これを解凍して分注→さらに冷凍して保存してもPCRには問題なく使えるでしょうか?】
gotaqの状態は、
25mlボトルで凍結状態→24時間常温状態→再び凍結・・・(今後の予定)→ボトル25mlを再び解凍→チューブに分注→再び−20度で凍結して保存→その都度使う

先輩たちからは解凍は1〜2回までと教えられてきました。サイトでは4度で2週間、融解解凍は厳禁、との情報もありました。今回は12時間常温保存だった上にさらに冷凍にしてしまいました。

宜しくお願いします。

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