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(無題) 削除/引用 No.7084-4 - 2018/07/19 (木) 15:25:32 - Kome >あさん ありがとうございます。 そうですよねー。自分もまさか発現してるはずがないと思っていたんですが。 >りさん 論理的なアドバイス、ありがとうございます。 Jurkatとか白血病系の細胞ならまだしも、通常の非白血病系統の細胞で発現している可能性が極めて低いと思っていました。 unstainとcontrolで明らかに差があって、1%PFA固定なし+FcRブロックにしたら差が消えてネガコンもポジコンもきれいに出るようになったので、固定してたのが悪かったのかなーと思いました。

(無題) 削除/引用 No.7084-3 - 2018/07/19 (木) 05:56:42 - り お使いの細胞株で、蛍光抗体なし（自家蛍光）とアイソタイプコントロールの差を見てみると良いと思います。ほとんど差がなければ、さらなるブロッキング（Fcブロックを含めて）は不要と考えて良いと思います。もし明らかな差があり、アイソタイプの蛍光域が目的の膜タンパク質の検出域と被ったりする場合は、ブロッキングの強度を上げる方法の一つとしてFcブロックも考慮されますが、線維芽細胞や固形がん細胞株でFcRが発現している可能性は極めて低いと思われ、Fcブロックよりも先に考える事がありそうですね。

(無題) 削除/引用 No.7084-2 - 2018/07/19 (木) 04:33:31 - あ FcRの発言していない細胞にFcブロッカーをかます必要性はないでしょう 。

フローサイトメトリーのときのFcRブロッキング 削除/引用 No.7084-1 - 2018/07/19 (木) 03:21:01 - Kome いつもトピックス参考にしております。 非白血病系の細胞株（固形がん細胞やFibroblast）の膜タンパク質をフローするときにFcRブロッキングするのは必須でしょうか。 使用する細胞株や検出する膜タンパク質の種類に依存するのでしょうが、皆様はFcRブロッキングのStepは必ずされておりますでしょうか。

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