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ヘマトキシリンの退色を防ぐ方法 トピック削除
No.6985-TOPIC - 2018/06/08 (金) 08:57:03 - sara
硬組織の凍結切片をヘマトキシリンで染色しています。
最近、切片によって退色具合が違うことに気づきました。
ずっと色を保てているスライドもあれば、1か月で黄色くなってしまうものもあります。
退色しにくいと聞いたので、ヘマトキシリン染色後にアンモニアで中和もしています。
脱水時間が短いのかと思い長くしてみようと思いますが(現在は100%アルコールは3分)、ほかに体色を防ぐポイントがありましたら、教えていただければありがたいです。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.6985-3 - 2018/06/14 (木) 09:33:58 - AP
脱水不十分は退色の原因になるといいます。
100% エタノールはす吸湿しやすくすぐ濃度が下がるのでこまめに交換。
保存中のエタノールも吸湿するのでモレキュラーシーブをいれて脱水処理をかけて置いたものを使用。

あと、ヘマトキシリン染色の後の媒染(色出し)のための水洗時間を十分長く取ると発色や染色の保持が良くなるようです。室温よりも50℃くらいに温めた水を使った方がよいということも聞いたことがあります。

(無題) 削除/引用
No.6985-2 - 2018/06/10 (日) 02:25:33 - qwsでfrgtひゅい
ヘマトキシリン液にもいろんな種類があり組成が異なり、染色法やその後の方法がちがいます。それぞれ考案者の名前がついて`ーーーーの処方の`というのが前につきます。わたしは市販されているマイヤーの処方のヘマトキシリン液でやってますが、5分程度染色したのち水道水で10分くらい流水洗で脱色するだけです。バックはほとんど染まらず核のみがきれいに染まり、封入後は退色も変色もしません。パラフィンも凍結もともに同様です。硬組織は経験ないです。

他の処方だと塩酸等での分別等の処理を要するものもあるようです。
硬組織に適した処方があるかもしれません。

ヘマトキシリンの退色を防ぐ方法 削除/引用
No.6985-1 - 2018/06/08 (金) 08:57:03 - sara
硬組織の凍結切片をヘマトキシリンで染色しています。
最近、切片によって退色具合が違うことに気づきました。
ずっと色を保てているスライドもあれば、1か月で黄色くなってしまうものもあります。
退色しにくいと聞いたので、ヘマトキシリン染色後にアンモニアで中和もしています。
脱水時間が短いのかと思い長くしてみようと思いますが(現在は100%アルコールは3分)、ほかに体色を防ぐポイントがありましたら、教えていただければありがたいです。
よろしくお願いします。

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