全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.6969-3 - 2018/06/03 (日) 10:26:10 - おお ＞バイアビリティがもともと低いのか、 それは実際に確認してみて起こすときに低かったのでしょうか、、、

(無題) 削除/引用 No.6969-2 - 2018/06/03 (日) 09:09:05 - VT マクロファージとの共培養により、その培養細胞の増殖がサポートされる事が分かっているのであれば、マクロファージ系の細胞株を放射線照射してフィーダーにする方が、簡単かもしれません。 脾臓を用いる場合、培養前に溶血処理することにより、赤血球はある程度除去できます。溶血後の脾臓細胞の８割はリンパ球で、培養プレートに付着しないので、培養翌日の洗浄により取り除く事ができます。かなり少ないとは思いますが、洗浄後に残った付着細胞が見られ、その一部は脾臓のマクロファージだと思います。個人的には、これがフィーダーとして機能するとは思えない（量が少ないので）のですが、やってみない事には、断定的なことは言えないですね。 マウスの初代培養でマクロファージを得る方法としては、腹腔の他に、骨髄細胞を用いる方法がよく知られています。骨髄細胞をサイトカインを含む培地で培養すると、前駆細胞から分化した、付着性のマクロファージを得る事ができます。脾臓より確実と思います。下記参照。 ttps://www.researchgate.net/post/What_is_the_best_protocol_to_obtain_Bone_Marrow_Derived_Macrophages_BMDM

腹腔由来フィーダーの代わりに脾細胞は使えますか？ 削除/引用 No.6969-1 - 2018/06/03 (日) 06:01:22 - M３ 液体窒素に眠る培養細胞株を起こそうとしています。 バイアビリティがもともと低いのか、起こしてもまったく生着細胞が認められず、増殖してくる細胞もゼロです。 マウス腹腔に冷PBSを打ち込んで、そこから得られる腹腔洗浄液をフィーダーとして起こす前日に撒いてはどうか？とアドバイスをいただきました。しかし私自身マウスのコロニーは所持しておらず、そのためラボに誰かマウスをサックする人がいれば声を掛けてさせてもらおうと思っています。 ただ多くが妊婦をサックしているラボですので、中々PBSをインジェクトするのは躊躇われます。 そこでその方が胎児を取り出した後、脾臓をいただいて、シングルセルにしたものをフィーダーに代用できないか考えています。いかがでしょうか？もちろん撒いた翌日には一面赤血球がいると思うので、それを洗浄により除去したところに細胞を起こそうと思っています。 腹腔マクロファージでなければいけないでしょうか？

全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---