Bio Technical フォーラム

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人工骨内に培養した骨芽細胞を分離したい トピック削除
No.6910-TOPIC - 2018/05/11 (金) 19:06:23 - JOE
現在、多孔性人工骨(hydroxylapatite scaffold)の中にMC3T3-E1(マウス骨芽細胞)を培養しているのですが(人工骨に細胞が付着しています。多孔性なので、小孔内にも細胞が付着しています)、人工骨内の細胞総数を測定するにはどうすればいいのか苦渋しております。

@DNA定量。
 DNAをどのように抽出すればいいのでしょうか。

A細胞が生きたまま、人工骨を脱灰して細胞を収穫しcell count。あるいは人工骨から細胞を剥離する方法があれば・・・

実験の初心者でして、上記が可能かどうかも判断が付きません。
なにかいい方法があれば、ご教授いただければ幸いです。
 
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ご返事ありがとうございます。 削除/引用
No.6910-3 - 2018/05/15 (火) 13:26:51 - JOE
細胞を剥離させず、酵素活性で定量するということですね。
なるほどです。
さっそく可能かどうかやってみます。
ご返事ありがとうございます。今後ともよろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.6910-2 - 2018/05/12 (土) 12:41:54 - mon
人工骨の大きさにも寄るけど、酸化還元酵素活性(MTT,alameblue)やその他酵素活性が使えるかも。人工骨の重量で測定値を割り算すると良いかな?
http://www.dojindo.co.jp/technical/pdf/catalog-project.pdf

人工骨内に培養した骨芽細胞を分離したい 削除/引用
No.6910-1 - 2018/05/11 (金) 19:06:23 - JOE
現在、多孔性人工骨(hydroxylapatite scaffold)の中にMC3T3-E1(マウス骨芽細胞)を培養しているのですが(人工骨に細胞が付着しています。多孔性なので、小孔内にも細胞が付着しています)、人工骨内の細胞総数を測定するにはどうすればいいのか苦渋しております。

@DNA定量。
 DNAをどのように抽出すればいいのでしょうか。

A細胞が生きたまま、人工骨を脱灰して細胞を収穫しcell count。あるいは人工骨から細胞を剥離する方法があれば・・・

実験の初心者でして、上記が可能かどうかも判断が付きません。
なにかいい方法があれば、ご教授いただければ幸いです。

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