Epifluorescence microscopeで、ミトコンドリアとゴルジ体と核を染めています。
ミトコンドリア(緑)にフォーカスを合わせ、画像取得し、その後、ゴルジ体(赤)に切り替えると微妙にフォーカスがずれています。この時、フォーカスをゴルジ体に合わせて、画像取得し、赤と緑をマージさせても良いのでしょうか?
今後、ミトコンドリアとゴルジ体を行き来するタンパク質をさらに染色する予定で、ゆくゆくはコンフォーカルで行わないといけないとは思いますが。(論文時に必須ですか?)
というわけでえ2つお聞きしたいのは、
1. エピで画像取得する際、それぞれのフィルターでフォーカスを合わせても良いのかどうか
2. 共局在を示す際、コンフォーカルは必須でしょうか?個人的に、エピの方が綺麗で鮮明な画像が取得されるんですよね。。。 |
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