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多量の塩を含む溶液からのエタ沈
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No.6785-TOPIC - 2018/03/21 (水) 20:59:49 - ふるみ
高濃度の塩を含む溶液からDNAを取ろうとしています。
エタ沈を試みたところ、やはりDNAとは違う塩が析出してしまいます。
量的なものも評価したいので、限外濾過などはしたくないのですが、なにかよい方法などないでしょうか?
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No.6785-4 - 2018/03/22 (木) 10:13:32 - AP
CsCl密度勾配超遠心で回収したプラスミドなんかは大量のCsClを含みますが、透析で脱塩するほかに、十分、水で希釈して(8倍だったか)EtOH pptするという方法もあります。
今回は、一旦沈殿した塩を含むプラスミドを再度、十分な水またはTEに溶解してEtOH pptすればいいでしょう。
あるいは、Sephcryl S-400やSephadex G-50などのスピンカラムでsize-exlusion gel filtration.
(無題)
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No.6785-3 - 2018/03/22 (木) 01:50:55 - おお
70%エタノールであらうと徐々になくなる塩もあります。KClとか。気になるならさらにもう一度エタ沈すればいいかと。
(無題)
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No.6785-2 - 2018/03/21 (水) 21:50:05 - mon
エタ沈を繰り返すか、PEG/NaCl沈殿を試みる。
多量の塩を含む溶液からのエタ沈
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No.6785-1 - 2018/03/21 (水) 20:59:49 - ふるみ
高濃度の塩を含む溶液からDNAを取ろうとしています。
エタ沈を試みたところ、やはりDNAとは違う塩が析出してしまいます。
量的なものも評価したいので、限外濾過などはしたくないのですが、なにかよい方法などないでしょうか?
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