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エタ沈の上清を捨てずに70%EtoH入れて遠心してしまいました トピック削除
No.6735-TOPIC - 2018/03/03 (土) 10:27:17 - 学部生
DNA 50μL+3M NAOAc 5μL+100% EtOH 125μLで
1回目のエタノール沈殿での遠心後、
その上清を捨てずに70%エタノールを100μL入れて遠心してしまいました。
現在も遠心中です。
この後DNAを回収できる方法はありませんでしょうか。
どうかご教授宜しくお願い致します。
 
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ありがとうございます 削除/引用
No.6735-4 - 2018/03/03 (土) 11:01:21 - 学部生
お二方、分かりやすくご教授いただきましてありがとうございました。
貴重なDNAのため、大変感謝しております。
確かに、70%EtoHに同じ濃度のものを量加えても変わらないですね。

これからちゃんと上清を廃棄して、
再び70%EtOHを加えて遠心機にかけようと思います。

本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.6735-3 - 2018/03/03 (土) 10:49:39 - AP
どんな実験操作でも理屈を理解するようにしよう。そうしないと、こういう風にトラブルがあった時、対処できない、ただのロボットになってします。いまや、決められた実験操作をやってくれるロボットが優秀なんだから、存在意義があやうくなるぞ。

DNA溶液に2〜2.5 volのEtOHを加えるというのは、終濃度67-70 %にすつってことだ。そこに70% EtOHを加えてもその濃度は変わらない。だからそのままふつうにEtOH ppt操作すれば良い。塩濃度がしょうしょう下がるけれど、問題になるほどではないだろう。心配なら3 uL くらい塩を足してもいいだろう。多少塩が多過ぎても、70% EtOH  でリンスするんだから大丈夫。

(無題) 削除/引用
No.6735-2 - 2018/03/03 (土) 10:30:52 - み
遠心後にペレットが存在するでしょうから、上清を捨てて、
もう一度70EtOHを1ml程度入れて、2min遠心後、上清を捨てたら塩が除けたDNAがペレットとして残っているはず。

エタ沈の上清を捨てずに70%EtoH入れて遠心してしまいました 削除/引用
No.6735-1 - 2018/03/03 (土) 10:27:17 - 学部生
DNA 50μL+3M NAOAc 5μL+100% EtOH 125μLで
1回目のエタノール沈殿での遠心後、
その上清を捨てずに70%エタノールを100μL入れて遠心してしまいました。
現在も遠心中です。
この後DNAを回収できる方法はありませんでしょうか。
どうかご教授宜しくお願い致します。

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