Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る　|　トピック一覧　|　研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム（readのみ）

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

腫瘍内投与のコツ トピック削除
No.6720-TOPIC - 2018/02/24 (土) 19:41:00 - cancer
初投稿です。

現在、マウスに移植した腫瘍内へ薬剤を投与する実験を行なっていますが、うまくいっておらず、コツ等を伝授して頂けたらと思い、投稿いたしました。

実験の流れとしては、
@1*10^7 cells/100ul pbsの細胞懸濁液をヌードマウスの皮下に投与
A腫瘍の大きさを定期的に測定
B体積換算で100-200mm^3 に到達したら、薬剤を単回腫瘍内へ投与
C腫瘍の成長率等を比較
という流れです。

腫瘍内への投与は、29Gのインスリン用の注射器で50ul投与しております。
可能なら一度の投与で3ヶ所に分けて注射したいと思っておりますが、1ヶ所への投与すらままならない状況です。
原因としては、腫瘍の大きさが小さすぎて腫瘍内へ綺麗に刺すことができない（貫通したり、腫瘍内に入れていたつもりがただの皮下投与になっている）からです。

腫瘍の大きさが大きくなりすぎると、投与はできても、薬剤が行き渡らずさほど効果がでません。多くの論文は、この100-200mm^3程度の大きさの腫瘍に一度に複数箇所に投与しておりますが、その細いプロトコル等は書かれておりません。

腫瘍内投与のコツ等がございましたら、教えていただけないでしょうか。
　
- このトピックにメッセージを投稿する -



全8件 ( 1 〜 8 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用
No.6720-9 - 2018/02/28 (水) 00:23:41 - cancer

の様

ありがとうございます。投与方法に関する具体的な説明、大変勉強になりました。

これまで、腫瘍内の圧力が高いからか、片手ではなかなかインジェクションできず、両手で押し込んでおりました。そのあたりも失敗の原因だったのかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.6720-8 - 2018/02/27 (火) 06:34:58 - の
>[Re:7] のさんは書きました :

> 左手で腫瘍をそっとつまみ上げて浮いたような状態？にする

つまみ上げて、と言うよりは、針をさすところの皮膚を少し左右（上下？）につっぱるようにしながら腫瘍を持つように軽く固定させて、針を刺しやすくしていたかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.6720-7 - 2018/02/27 (火) 01:07:35 - の
同じような実験をやったことがあります。投与自体はAnimal Core Facilityの人にやってもらいました。テキストで表現するのは難しいですが、

マウスに麻酔をかけて眠らせる
左手で腫瘍をそっとつまみ上げて浮いたような状態？にする
右手で注射器をさして、人差し指でインジェクション

インジェクションは時計でいいますと3時の方向から10時半へさして少し入れる、針を完全に抜かずに少しだけ引き出して9時の方向へさして少し入れる、少し引き出して7時半へいれて残り全部入れる、そのまま少し置いて、ゆっくり引き出す。引き出した後数秒キムワイプでさした穴を押さえて終了。という流れだったと思います。ただやはり難しかったです。時々少しもれてきたこともありました。

(無題) 削除/引用
No.6720-6 - 2018/02/26 (月) 23:01:31 - cancer
ねずみ様

ありがとうございます。一度に三ヶ所というのは、針を完全には抜かずに向きを変えて刺し直して、計3ヶ所に投与という意味で用いました。わかりにくい表現になってしまい、申し訳ございません。

ゆっくり抜くのが良いというアドバイスありがとうございます。今後、気を付けます。

粘性に関しては、薬剤の性質上、生理食塩水に溶かさざるを得ないので、そこは変更できそうにありません。。。

(無題) 削除/引用
No.6720-4 - 2018/02/26 (月) 10:14:28 - ねずみ
一度に三ヶ所って、三つの穴を作るということですか？
穴を複数個あけたら漏れます

腫瘍ボリュームはその程度で適応かと思います。
針は27-29ゲージでおそらく良いです。
抜くときに、とにかくゆっくり！
2.3ミリぬいて、10秒おく程度で繰り返していました。
粘性が高いと漏れにくいです。
ただの生理食塩水とかはやっぱり出ますね

(無題) 削除/引用
No.6720-3 - 2018/02/25 (日) 15:26:23 - cancer

ち様

ありがとうございます。youtube等調べてみましたが、腫瘍内投与を行なっている動画は見当たりませんでした。

ご存知でしたら、教えていただけないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.6720-2 - 2018/02/24 (土) 21:56:38 - ち
YouTubeとかみてみたら？

腫瘍内投与のコツ 削除/引用
No.6720-1 - 2018/02/24 (土) 19:41:00 - cancer
初投稿です。

現在、マウスに移植した腫瘍内へ薬剤を投与する実験を行なっていますが、うまくいっておらず、コツ等を伝授して頂けたらと思い、投稿いたしました。

実験の流れとしては、
@1*10^7 cells/100ul pbsの細胞懸濁液をヌードマウスの皮下に投与
A腫瘍の大きさを定期的に測定
B体積換算で100-200mm^3 に到達したら、薬剤を単回腫瘍内へ投与
C腫瘍の成長率等を比較
という流れです。

腫瘍内への投与は、29Gのインスリン用の注射器で50ul投与しております。
可能なら一度の投与で3ヶ所に分けて注射したいと思っておりますが、1ヶ所への投与すらままならない状況です。
原因としては、腫瘍の大きさが小さすぎて腫瘍内へ綺麗に刺すことができない（貫通したり、腫瘍内に入れていたつもりがただの皮下投与になっている）からです。

腫瘍の大きさが大きくなりすぎると、投与はできても、薬剤が行き渡らずさほど効果がでません。多くの論文は、この100-200mm^3程度の大きさの腫瘍に一度に複数箇所に投与しておりますが、その細いプロトコル等は書かれておりません。

腫瘍内投与のコツ等がございましたら、教えていただけないでしょうか。
全8件 ( 1 〜 8 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール  　アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます）
上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません）
解決（問題が解決した際にチェックしてください）
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 
〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。