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(無題) 削除/引用 No.6621-19 - 2018/01/27 (土) 10:27:27 - TS FBSの濾過滅菌をするのであれば、確かに詰まりやすいので、 まずベンチ外で良いので、0.45ミクロンのフィルターを通して、 そのあとベンチ内で0.2ミクロンを通せばよいです。

(無題) 削除/引用 No.6621-18 - 2018/01/27 (土) 02:43:39 - YK FBSの濾過滅菌は無理だと思います。 たぶん目が詰まると思いますよ。

(無題) 削除/引用 No.6621-17 - 2018/01/26 (金) 22:01:16 - 卒論いやだ よよよさん返信ありがとうございます。 濾過滅菌・・・ 私の研究室には、必要なものがなさそうです。

(無題) 削除/引用 No.6621-16 - 2018/01/26 (金) 21:55:45 - 卒論いやだ aaaaaさん返信ありがとうございます。 そういった経路で混入することもあるのですね。 インキュベーターの掃除をやってみます。 過去の先輩のデバイスも別の場所に移します。 クリーンベンチではなく、模したクリーンベンチですね。笑 やはり自分が下手なだけですかね・・・

(無題) 削除/引用 No.6621-15 - 2018/01/26 (金) 21:45:38 - 卒論いやだ 通りすがりさん返信ありがとうございます。 さすがに前者の方はないです。笑 タバコは、あまり関係なさそうです。

(無題) 削除/引用 No.6621-14 - 2018/01/26 (金) 11:37:00 - よよよ FBSを濾過滅菌して使えばいいと思います。原因が分からないうちは何度でもコンタミするでしょう。手技や環境が安定したら買い直す。

(無題) 削除/引用 No.6621-13 - 2018/01/26 (金) 11:23:51 - aaaaa >フラスコ内で細胞培養しているのですが、そういった場合でもインキュベータの汚れでコンタミすることは、あるのでしょうか？ もちろんあります。 助かる場合も多いでしょうが、キャップ周辺から混入したり 培養後の操作時にコンタミしたりします。 一度コンタミした場合、使用したインキュベーターもしっかり掃除すべきだと思います。 他の研究者の迷惑にもなり得ます。 >クリーンベンチは、教授がメーカーから購入したものではなく、教授が手作りしたもので色々な部品を継ぎ接ぎで作ったものを使用していて、所々割れたり、穴が開いている事を隙間が開いたりという表現をしてしまいました。 それは色々とスゴイですね。 > タバコなどから、バクテリアなどが混入 もしそうなら問題はタバコでは無く手技

(無題) 削除/引用 No.6621-12 - 2018/01/26 (金) 11:06:29 - 通りすがり > タバコなどから、バクテリアなどが混入 どういうこと？ クリーンベンチの中でタバコ吸いながら作業してるんですか？ それとも余程ヤニだらけでホコリを集めやすい白衣で作業してるんですか？ 前者は色々論外。実験室は基本的に室内での飲食、喫煙は禁止でしょう。 後者はホコリからのコンタミはあり得るでしょうねとは言えますが、煙草が原因でそうまでなっている人は見たことありません。

(無題) 削除/引用 No.6621-11 - 2018/01/26 (金) 09:02:14 - 卒論いやだ あと私は、タバコを吸っていんるのですが、タバコなどから、バクテリアなどが混入することはあるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.6621-10 - 2018/01/26 (金) 08:56:40 - 卒論いやだ DH5Aさん返信ありがとうございます。 そういった使用方法もあるのですね。勉強になります。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.6621-9 - 2018/01/26 (金) 08:42:58 - 卒論いやだ おおさん返信ありがとうございます。 FBSは私が分注したわけではなく、過去の先輩らが分注したものを使用しているので、その時に何か混じった可能性も考えられるのかなと思っています。 クリーンベンチは、教授がメーカーから購入したものではなく、教授が手作りしたもので色々な部品を継ぎ接ぎで作ったものを使用していて、所々割れたり、穴が開いている事を隙間が開いたりという表現をしてしまいました。 分かりにくくてすみません。 通気孔も確認してみます。 インキュベーターは、過去の先輩の細胞播種後のデバイスサンプルが残ったりしているので綺麗だとは言えないです。 フラスコ内で細胞培養しているのですが、そういった場合でもインキュベータの汚れでコンタミすることは、あるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.6621-8 - 2018/01/26 (金) 03:56:43 - おお >クリーンベンチの隙間が開いたりしているので、 これも訳がわからないのだけど、クリーンベンチの仕組みを理解しているのか、、、 UVやアルコールをつかって日頃から清潔に保っておくのは当たり前のことです。まあクリーンベンチ内の内部とか変なところに汚いものが溜まっていたら仕組み上大丈夫でもコンタミする危険性は高くなるかもしれません。ベンチの作業するところの下側に空気が流れるようになっているなら、そこへ流れる通気口の網からなにか入って溜まっているかもしれません。培地なんか流れていたらUVは届かないですし（実際コンタミすることがなくても結構そういうところは汚くなってたりする）。まあそういうのが原因でコンタミっていうのは滅多にないですけど。 あとIncubatorはきれいですか？ FBSがコンタミしているのかどうか、コンタミしたとしてどこでコンタミしたのか、コンタミのソースはなにか特定する努力は必要です。

(無題) 削除/引用 No.6621-7 - 2018/01/26 (金) 03:42:38 - おお >やはりFBSが原因になることもあるんですね。 だからそれも手技の問題でしょう、、、

(無題) 削除/引用 No.6621-6 - 2018/01/26 (金) 01:53:59 - DH5A コンタミが疑われるFBSでブロッキング剤として使用したらいいと思います。もったいないですし。

(無題) 削除/引用 No.6621-5 - 2018/01/26 (金) 01:25:45 - 卒論いやだ 卒論がんばれさんありがとうございます。笑 がんばります！ D-MEMのボトルを２本連続でコンタミしてしまったので、外的要因がFBSを添加したときにくらいしか思い当たらなかったので、FBSが原因かなと勝手に思っています。笑 やはりFBSが原因になることもあるんですね。 FBSは高価ですよね・・・。 この時期に予算が残っているのだろうか・・・汗

(無題) 削除/引用 No.6621-4 - 2018/01/26 (金) 01:01:33 - 卒論がんばれ 以前FBSボトルの解凍方法か非働化方法か分注方法が悪かったのか、FBSボトル自体がコンタミしたと考えられることもありました。高価ですのでショックでしたが、新しいFBSを購入しなおし、培地のコンタミは見えなくなりました。 もちろん仕事の前後でベンチ上などをエタノールできれいに拭くことも予防になると思います。

(無題) 削除/引用 No.6621-3 - 2018/01/26 (金) 00:19:18 - 卒論いやだ おおさん　返信ありがとうございます。 クリーンベンチの隙間が開いたりしているので、環境は、かなり悪いと思います。 そういったバクテリアなどは、エタノールなどで殺菌して予防できるのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.6621-2 - 2018/01/25 (木) 23:57:24 - おお >この黒いつぶつぶて何なのでしょうか？ バクテリア >こういったものがＦＢＳから混入することってありますか？ 培養用にかったFBSならFBSが汚染されていることはまずない。手技か環境が原因。

コンタミする。　助けてください！ 削除/引用 No.6621-1 - 2018/01/25 (木) 23:39:33 - 卒論いやだ 最近よくコンタミします。黄色くはならないんですが、培養液がにごります。 何が原因か調べてみたところ、培養液が原因でした。 培養液にFBSを入れて、使用しているんですが、培養液だけインキュベーターに入れてみたところ、色はピンクがにごった感じになり、顕微鏡で観察すると、黒いつぶつぶみたいなものが動いています。 この黒いつぶつぶて何なのでしょうか？ こういったものがＦＢＳから混入することってありますか？

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