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(無題) 削除/引用 No.6595-7 - 2018/01/23 (火) 13:18:16 - アプライできない 返信遅れ申し訳ございません 解決しました。 濃縮ゲルの重合時間を延ばしたら直りました。 重合していないものが邪魔していたみたいです。

(無題) 削除/引用 No.6595-6 - 2018/01/19 (金) 15:01:57 - ~ まずは、泳動バッファーをチューブに入れて、そのサンプル+loading bufferを垂らしてみては？ それで浮くなら、サンプルの比重の問題でゲルは無関係でしょう。 サンプル由来の脂質が怪しいなら有機溶剤等での脱脂処理を検討しては。

(無題) 削除/引用 No.6595-5 - 2018/01/19 (金) 05:27:00 - おお ゲノムのDNAがそういうトラブルを起こすことはありますね。アルコールが混じっていたりするとトラブルになることもあります。ゲノムのDNAだとDNase処理でも対応できるかもしれません。 いずれにしろなにがしかの夾雑物の影響のような気がしますので、そこをどうするかですね。単純にはもっと薄めるというのもありかと思います。蛋白濃度は測りましたか？ ＞抽出物は動物由来組織のタンパクを10 mMイミダゾール（pH 7）に溶解したものです。 このプロセスを詳しくかけませんか？

(無題) 削除/引用 No.6595-4 - 2018/01/18 (木) 23:43:34 - cc DNAが大量に混入してる可能性

(無題) 削除/引用 No.6595-3 - 2018/01/18 (木) 22:55:34 - アプライできない 抽出物は動物由来組織のタンパクを10 mMイミダゾール（pH 7）に溶解したものです。 サンプルとlording bufferは3:1で混合，加熱・還元処理しています。 グリセロールの終濃度は12.5%です。

(無題) 削除/引用 No.6595-2 - 2018/01/18 (木) 21:57:19 - AP ある抽出物と、肝心なところをぼかしてしまっては、、、、、、

SDS-PAGEのサンプルアプライ 削除/引用 No.6595-1 - 2018/01/18 (木) 20:32:15 - アプライできない ある抽出物のサンプルをSDS-PAGEを行おうとしているのですが， アプライがうまくいきません。 普通，ウェルにアプライすればサンプルが勝手に沈んでいくと思うのですが 沈まず，浮いてします。 比重を重くするためにlording bufferのグリセロール濃度を上げましたが 改善しませんでした。他のタンパクサンプルを混合した場合では，沈んでくれるので lording buffer側の問題はないかと考えております。 ゲルに問題がないかの点もですが， ゲルの屑なども特に残っておりません。 念押しで，泳動バッファーで洗っております。 抽出物サンプルが側の比重が軽すぎるために生じるかと思われますが， 改善策が思い浮かびません。何かよい案はないでしょうか？

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