Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

COS-7への遺伝子導入(一過性)、タンパク質発現 トピック削除
No.6563-TOPIC - 2018/01/09 (火) 14:47:41 - COS-7
COS-7細胞で分泌タンパク質を発現させたいのですが、導入試薬としてPEImaxを用いられておられる方はいらっしゃいますか?

私どものlabではHEK293TへはルーチンにPEImaxを利用して発現させていますが、COS-7ではどうか、皆様のご意見をお聞きできればと思い、トピックを立てました。よろしくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.6563-6 - 2018/01/11 (木) 10:47:56 - COS-7
よっしー様、おお様、

実は私も昨晩この方法を考え付きました。笑。
おっしゃる通りですね。それで行ってみます。
ありがとうございました。


>[Re:4] よっしーさんは書きました :
> 培養に使う血清をプロテインGにかけてから使えばよろしいのでは?

(無題) 削除/引用
No.6563-5 - 2018/01/11 (木) 10:22:17 - おお
>[Re:4] よっしーさんは書きました :
> 培養に使う血清をプロテインGにかけてから使えばよろしいのでは?

同じようなことを書こうとしてました。

(無題) 削除/引用
No.6563-4 - 2018/01/11 (木) 09:36:25 - よっしー
培養に使う血清をプロテインGにかけてから使えばよろしいのでは?

(無題) 削除/引用
No.6563-3 - 2018/01/11 (木) 00:00:20 - COS-7
おお様、ありがとうございます。

比較的入る細胞とお聞きして安心しました。

human IgG2 Fc融合タンパク質を分泌精製させたいのですが、プロテインGカラムだと牛血清由来のIgGが共に精製されてしまうという問題があるようです。

この場合、無血清培地で行うか、低IgGの牛血清を用いようと思いますが、コンプリートメディウムからこのようなメディウムに交換した際、何度もディッシュを洗わないと、IgGが残存してしまうような気がします。もし、プロテインGカラムで牛IgGが僅かながらにも混入して来てしまった場合、Fc融合タンパク質とを分離するいい方法はありませんでしょうか?

質問に質問を重ねてしまい、誠に恐縮ですが、ご意見を聞かせて頂けますと幸いです。

(無題) 削除/引用
No.6563-2 - 2018/01/10 (水) 16:06:18 - おお
COS-7もいろいろな方法で比較的よく入る細胞ですから、私なら考えるよりはとにかくある程度条件をふって入るかどうか実際に見てみます。

また文献や試薬やさんの資料などで条件など書いたものもおそらく見つかるはずです。

COS-7への遺伝子導入(一過性)、タンパク質発現 削除/引用
No.6563-1 - 2018/01/09 (火) 14:47:41 - COS-7
COS-7細胞で分泌タンパク質を発現させたいのですが、導入試薬としてPEImaxを用いられておられる方はいらっしゃいますか?

私どものlabではHEK293TへはルーチンにPEImaxを利用して発現させていますが、COS-7ではどうか、皆様のご意見をお聞きできればと思い、トピックを立てました。よろしくお願いいたします。

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。