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(無題) 削除/引用 No.6559-6 - 2018/01/07 (日) 01:37:11 - X ILC2/3のcommon progenitor同定と理解しますが、Flt-3は必要ですか？　CLPとの鑑別に必要ということでしょうか？　いずれにせよ、これらの細胞はlineage陰性ですので、事前にdepleteしてなくても、解析時にはゲートされているはずですよね？ 他の骨髄Flt-3陽性細胞（骨髄球系の前駆細胞や、樹状細胞系）は検出可能でしょうか？　ポジコンの細胞が準備できれば、抗体がワークしているかどうかは確認できますね。

(無題) 削除/引用 No.6559-5 - 2018/01/06 (土) 15:18:11 - 染色 ありがとうございます。 参考にいたします。

(無題) 削除/引用 No.6559-4 - 2018/01/05 (金) 20:51:44 - TK-1 もしFBSの入ったバッファーやMEDIAを使っているのなら、BSAに変えた方がいいです。

(無題) 削除/引用 No.6559-3 - 2018/01/05 (金) 14:41:48 - 染色 到らない点があり申し訳ありません。 実験に関するご指摘ありがとうございます。 抗体がワークしていない点を考慮し実験を行っていきたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.6559-2 - 2018/01/05 (金) 14:28:22 - 服部 略称を使わず、きちんとcommon helper lymphoid progenitor (CHILP)とフルネームで書いた方がいいです。 染色してうまくいかないのは、Flt3ポジがサンプル中にいないのか、抗体がワークしていないか（死んでいる）ですが、後者の可能性は除外できますか？ Lin-でnegative selectionすればstemのようなminorなimmature populationはハイライトされてくると思いますので、Lin-は使うべきだと思います。 >[Re:1] 染色さんは書きました : > Bone marrowのFlt3染色がうまくいきません。 > 染色は以下のように行っております。 > > １：大腿骨を一本取り出す > ２：大腿骨の両端を切りPBSで中を洗いBone marrowを取り出す > ３：遠心 > ４：ACK処理 > ５：WASH > ６：染色 > > CHILPを同定するためにFLt3で染めているのですがうまくいきません。ある論文ではLin markerでdepleteしたのち染色しているものがあるのですが、それが原因なのでしょうか。 > > よろしくお願いします。

Bone marrow をFtt3で染めたい(CHILPの同定） 削除/引用 No.6559-1 - 2018/01/05 (金) 14:04:16 - 染色 Bone marrowのFlt3染色がうまくいきません。 染色は以下のように行っております。 １：大腿骨を一本取り出す ２：大腿骨の両端を切りPBSで中を洗いBone marrowを取り出す ３：遠心 ４：ACK処理 ５：WASH ６：染色 CHILPを同定するためにFLt3で染めているのですがうまくいきません。ある論文ではLin markerでdepleteしたのち染色しているものがあるのですが、それが原因なのでしょうか。 よろしくお願いします。

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