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(無題) 削除/引用 No.6543-2 - 2017/12/25 (月) 18:30:00 - おお >目的遺伝子+CMVプロモーター配列をクローニングし、遺伝子導入するという手法は一般的に行われている手法なのでしょうか。 Yes >レトロウイルスベクターで染色体に遺伝子導入する場合、どこに組み込まれるか分からないので、プロモーター配列も含めて導入するという考えだそうです。 そうでしょうか？第一世代のベクターはそのようなプロモーターなしで作られたと思ってます。LTRがプロモーターとして働きますので。実際に本当のウイルすはそれを利用してウイルス蛋白を発現し、複製しています。 ただし、LRTのプロモーター活性はゲノムに挿入されたとき周りの遺伝子も活性化する恐れがあるのでプロモーター活性がないLTRにおきかえたウイルスベクターが今はポピュラーなんだと思いますが、その場合はウイスルゲノムとなる部分にプロモーターがないと発現ができなくなるとおもいます。 第一世代というか初期のものはLTRのプロモーター活性に関係なく内部にプロモーターを入れているのもあったかもしれません。

Hela細胞　安定発現株の作成　プロモーターについて 削除/引用 No.6543-1 - 2017/12/25 (月) 16:41:48 - 細胞培養初心者 Hela細胞で安定発現株を作成する場合に、発現量を上げるために、レトロウイルスベクターに目的遺伝子+CMVプロモーター配列をクローニングし、遺伝子導入するという手法は一般的に行われている手法なのでしょうか。 レトロウイルスベクターで染色体に遺伝子導入する場合、どこに組み込まれるか分からないので、プロモーター配列も含めて導入するという考えだそうです。

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